|
槐米是液相豆科动物槐的去世板花蕾，有凉血止血，色谱清肝泻火等成果。法测芦丁为槐米的定槐的不断定度评定主要活性成份，当初我国医药工业中常以槐米为主要质料提取芦丁，米中含量最高可达30%左右。芦丁芦丁属于黄酮类化合物，液相钻研表明，色谱芦丁具备抗心脑血管疾病、法测免疫调节浸染、定槐的不断定度评定抗氧化、米中延缓朽迈等浸染。芦丁芦丁可能间接作为药品，液相也用于复配以及药物的色谱中间体，可用作抗氧剂及人造食用黄色素。法测外洋主要用于食物、化装品的削减剂以及着色剂。 本试验建树了槐米中芦丁含量测定的功能液相色谱方式，参考JJF1059.1-2012《丈量不断定度评定与呈现》以及CNAS-GL06《化学合成中不断定度的评估指南》建树数学模子，定量测定不断定度的各个重量，审核影响不断定度的主要因素，开始建树了适用于评估HPLC法测定槐米中芦丁含量不断定度的方式，以期增强对于含量测定服从精确性以及可信度的意见，为样品前解决步骤啰嗦的合成方式建树实用的不断定度评定挨次提供参考。 一、资料与方式 一、资料与试剂 芦丁规范品（含量HPLC：90.5%）；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为合成纯；槐米药材收集于山西、陕西以及广西等地，经山西省林业迷信钻研院张素华低级工程师判断为豆科动物槐SophorajaponicaL的花蕾。 二、仪器与配置装备部署 LC-2010AHT功能液相色谱仪；AB104.N合终日平；KQ3200DE数控超声洗涤器；UPHW-I-90T型优普系列超纯水系统。 三、试验方式 （1）比力品溶液的制备 详尽称取芦丁比力品5.4mg，置于50mL容量瓶中，加甲醇消融并稀释至刻度，患上0.0979g／L的蕴藏液，4℃冰箱中保存备用。 （2）供试品溶液的制备 称取槐米粗粉约0.1g，详尽称定，置具塞锥形瓶中，详尽退出50mL甲醇，称定重量，超声解决（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷后再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过。详尽量取续滤液2mL，置10mL量瓶中加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过作为供试品溶液。同时以甲醇做空缺比力溶液。 （3）色谱条件 色谱柱：Agela.InnovalC18（4.6妹妹×250妹妹，5μm）反相色谱柱；检测器：紫外检测器；柱温：30℃；流速：1.0mL／min。行动相∶甲醇-1%冰醋酸溶液（32∶68），等度洗脱；检测波长：257nm，进样量：10μL。 四、数学模子 槐米中芦丁的合计公式为：
式中：X为样品中芦丁含量，%；C为供试液中芦丁浓度，g／L；V为供试液体积，mL；m为样品质量，g；F为稀释因子。 五、不断定度源头合成 本方式操作步骤相对于重大，影响因素较多，经由火析全部试验历程的影响因素，并参照含量合计公式，合成不断定源头主要包罗：样品制备平均度、样品的定容、规范品、规范曲线的拟合以及仪怜惜复性等方面。 二、源头与合成 一、样品制备平均度引入的不断定度 被测样品花蕾区别部位的芦丁含量差距较大，遵照规范取样方式，将对于立批次样品全副破碎捣毁混匀后，称取10份按槐米粗粉约0.1g，详尽称定，置具塞锥形瓶中，详尽退出50mL甲醇，称定重量，超声解决（功率250W，频率25kHz）30分钟，放冷后再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过。详尽量取续滤液2mL，置10mL量瓶中加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过作为供试品溶液。同时以甲醇做空缺比力溶液分说测定，评定样品制备的平均度，测定服从见表1。此外重复性丈量已经包罗在样品平均度的试验中。
芦丁含量的平均值：X-=18.54% 测定例范差Sx用贝塞尔公式合计： 
样品扩散平均度引入的相对于规范不断定度u（x）为： 
二、样品定容引入的不断定度 （1）由校准引入的规范不断定度 依据JJG196—2006《罕用玻璃量具检定例程》，A级50mL单标线吸量管最大允差为±0.050mL，A级2mL分度吸量管最大允差为±0.012mL，A级10mL单标线容量瓶最大允差为±0.020mL，属B类评定，遵照矩形扩散思考，k=根号3，分解校准引入的相对于不断定度： 
（2）由温度变换引入的规范不断定度 在样品解决历程中需量取甲醇50mL、续滤液2mL并定容至10mL，试验室的温度在±4℃之间变换，20℃甲醇体积缩短系数为1.19×10-3／℃。在试验操作时，移液管以及容量瓶中的溶液所处情景的温度差距很小，因此可能轻忽不计。假如温度变换是矩形扩散，由温度变换产生的不断定度依据公式（2）合计，服从为：u（t1)=0.137,u(t2)=0.00550,u(t3)=0.0275 
分解温度引入的相对于规范不断定度： 
由上述重量分解样品定容引入的相对于规范不断定度为： 
申明：本文所用图片、翰墨源头《中国食物削减剂》，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割 相干链接：芦丁，冰醋酸，甲醇 | 
喜欢
讨厌