典型的酶活农药残留合成主要依靠色谱、色谱质谱联用等理化合成技术，性抑需要磨炼有素的制合合成技术职员、业余化的成法试验室以及仪器配置装备部署，合成样品的酶活制备历程相对于重大，合成光阴长、性抑老本高，制合难以适应少许样品以及现场样品快捷检测的成法要求。为适应农副产物的酶活产地源头监控、陈腐农副产物交易现场的性抑快捷检测以及收支口农副产物的检测时效，需要钻研开辟快捷功能的制合农药残留检测方式。随着性命迷信、成法化学、酶活医学、性抑新资料等学科的制合发展以及融会，合成化学从典型的物理化学别离合成发展到重大系统中的份子识别，检测灵便度已经进入了单个份子的水平。以生物合成化学为根基的合成技术，如酶活性抑制合成、免疫合成、生物传感器等，以其啰嗦快捷、特异灵便、样品用量少、老本高尚、不需要贵重仪器等劣势，成为20世纪前期以来农药残留合成畛域的一个主要发展偏差。

运用酶活性抑制合成、酶联免疫吸附合成、金标免疫色谱、生物传感器、生物芯片等今世生物合成技术测定农药残留，对于少许样本妨碍现场快捷筛查定性合成以及开始定量合成，须要时对于初筛呈阴性或者有疑难的样品再用色谱、波谱等典型的理化方式妨碍确证，可大大普及检测功能以及着落检测老本。接管酶活性抑制合成、免疫合成等今世生物合成技术快捷检测农药残留，普及其晃动性以及精确度，并逐步使方式则范化，是国内皮毛干畛域的迷信使命者为之勤勉的指标以及钻研热门之一。

有机磷酸酯以及氨基甲酸酯是两类紧张的有机分解农药，不断是农副产物特意是果蔬中农药残留的主要检测工具之一。果蔬是比照非凡的农产物，良多蔬菜(如叶菜)的愿望以及收获期短，愿望季节病虫害防治引起的农药残留成果较多，成为农产物牢靠监控的重点。但蔬菜(特意是叶菜)的保鲜期很短，如接管老例色谱、波谱以及色谱质谱联用法检测，没等检测竣事，蔬菜就曾经患上到了食用价格。因此用于快捷检测蔬菜等农副产物中有机磷以及氨基甲酸酯类农药残留的酶活性抑制技术及其产物被宽泛钻研以及开辟运用。

一、酶活性抑制合成法概述

Giang与Hall(1951)运用有机磷酸酯农药、Zweig以及Archer(1958)运用氨基甲酸酯类农药在体外对于乙酰胆碱酯酶(acetylcholine est。erase，AChE)具备抑制作用的道理，经由测定乙酰胆碱酯酶催化水解乙酰胆碱产生乙酸的量(ApH)来掂量酶活性被抑制的水平，对于敌敌畏、速灭磷、甲萘威等农药遏制定量测定。Kramer与Gamsorl(1958)以乙酸胆碱的相似物靛酚乙酸酯作乙酰胆碱酯酶的底物，经由比色测定乙酰胆碱酯酶催化水解靛酚乙酸酯所产生的蓝色的靛酚的量，可检出1～10μg的多种有机磷以及氨基甲酸酯类化合物，该方式成为其后接管比色法对于有机磷氨基甲酸酯类农药妨碍测定的根基。1968年，Mendoza等将薄层色谱与酶活性抑制法相散漫，经由在薄层板上别离以及显色来测定10种有机磷以及氨基甲酸酯类农药，最小检出量可达到ng水平，有较好的重现性，其后成为一种典型的有机磷以及氨基甲酸酯类农药测定法被宽泛接管。20世纪80年月，人们开始以源头充实、取材以及制备都十分不便的动物酯酶替换动物酶源，建树薄层色谱动物酯酶活性抑制合成法，为酶活性抑制合成法的进一步推广以及运用开拓了新空间。20世纪90年月以来，国内外以酶活性抑制合成法为根基，先后开收回测定有机磷以及氨基甲酸酯类农药的快捷测定试剂、速测卡以及速测仪，酶活性抑制合成法依然是我国当初现场快捷检测蔬菜等农副产物中有机磷以及氨基甲酸酯类农药残留的主要方式。

二、酶活性抑制合成法道理

有机磷以及氨基甲酸酯类农药都是神经毒剂，对于昆虫、哺乳动物(包罗人体)神经传递历程中具备紧张浸染的乙酰胆碱酯酶具备强烈的抑制作用。当乙酰胆碱酯酶活性被抑制时，该酶对于在神经传导历程中起紧张浸染的乙酰胆碱的水解不能个别妨碍，从而导致酶的底物乙酰胆碱的积攒，影响动物个别的神经传导，引起神经中毒甚至导致诞生。酶活性抑制法快捷检测有机磷以及氨基甲酸酯类农药残留便是运用这一神经毒理学道理来实现的。当被测样品提取液中不含或者含有良大批的有机磷或者氨基甲酸酯类农药时，乙酰胆碱酯酶的活性就不被抑制或者仅被重大抑制，酶的底物乙酰胆碱就能被水解或者大全副被水解，水解产物与加人系统中的显色剂反映产生有色物资，可经由比色法妨碍测定。假如试样提取液中含有未必量的有机磷或者氨基甲酸酯类农药，酶的活性就会受到抑制或者全副抑制，试样中退出的酶的底物就不能被酶水解或者全副水解，从而不显色或者显色很浅，用分光光度计测定吸光度值，以不含有机磷或者氨基甲酸酯类的农药为比力，合计酶活性被抑制的百分率。抑制百分率与有机磷或者氨基甲酸酯类农药的浓度在未必畛域内呈正比，据此对于有机磷或者氨基甲酸酯类农药遏制定性测定以及定量测定。

羧酸酯酶(非特同性酯酶的一种)与乙酰胆碱酯酶相似，均以丝氨酸残基作为活性中间，因此对于乙酰胆碱酯酶有抑制作用的有机磷以及氨基甲酸酯类农药对于羧酸酯酶也有抑制作用，因此依据有机磷以及氨基甲酸酯类农药对于羧酸酯酶活性抑制作用的有无或者巨细，也可能对于有机磷或者氨基甲酸酯类农药遏制定性测定以及定量测定。

酶活性抑制法检测有机磷或者氨基甲酸酯类农药的基源头根基理见图6—1。

近些年来，商品化酶活性抑制法检测产物(如酶片、酶标签、速测箱等)大概况是建树在上述显色反映根基上的，可是除了有机磷以及氨基甲酸酯类物资有可能对于乙酰胆碱酯酶活性产生抑制作用外，某些氯代烟碱相似物对于乙酰胆碱酯酶也有未必的抑制作用，因此检测历程中需要留意由此引起的假阴性征兆。

参考资料：农药残留合成