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洋葱中黄酮类化合物体外抗氧化活性钻研(一)

发表于 2024-10-18 12:27:39 来源:饕餮之徒网

洋葱(AlliumcepaL.),洋葱氧化二年生木本动物。中黄钻研洋葱中含有多种实用成份。酮类以黄酮类化合物为主。化合活性黄酮类化合物除了具备多种心理活性外,物体外抗仍是洋葱氧化功能优异的人造抗氧化剂。当初,中黄钻研国内对于银杏黄酮、酮类葛根黄酮、化合活性山楂黄酮等的物体外抗钻研报道较多,对于洋葱黄酮类化合物的洋葱氧化钻研较少,对于其体外抗氧化活性的中黄钻研钻研尚未见报道。本文旨在经由多少总体外试验系统钻研洋葱中黄酮类化合物的酮类抗氧化活性。以期普及洋葱产物的化合活性附加值,为使洋葱黄酮类化合物作为人造抗氧化剂以及功能性食物开辟运用提供事实根基以及试验依据。物体外抗

1 资料与方式

1.1 试验资料、仪器以及试剂

1.1.1 质料

别致红皮洋葱、别致鸡蛋购于安徽省凤阳县。

1.1.2 主要仪器

HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);高速万能破碎捣毁机(天津泰斯特仪器有限公司);TDL-5型离神思(上海安亭迷信仪器厂);101AS-3型数显恒温去世板箱(上海浦东跃欣迷信仪器厂);FA/JA型电子天平(上海详尽迷信仪器有限公司);7230G型可见分光光度计(上海详尽迷信仪器有限公司);XP-2CA型电冰箱(青岛海尔股份有限公司)。

1.1.3 主要试剂

2,6-二叔丁基-4-甲基酚(BHT),食物级;1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH),sigma公司;菲咯嗪(Ferrozine),fluka公司;其余试剂均为国产合成纯。

1.2 试验方式

1.2.1 洋葱黄酮类化合物的制备

洋葱黄酮类化合物的制备工艺为:别致红皮洋葱→去外皮→切丝→去世板(60℃,24h)→破碎捣毁→脱脂(煤油醚按液料比15mL/g脱脂3次)→体积分数70%乙醇浸提(液料比20mL/g,温度70℃,光阴1.5h)→离心(4500r/min,10rain)→上清液(洋葱黄酮类化合物粗提物)。

1.2.2 洋葱黄酮类化合物资量浓度的测定

以芦丁为规范品,参照文献的方式测定洋葱黄酮类化合物的品质浓度。

1.2.3 洋葱黄酮类化合物抗氧化活性的测定

1.2.3.1 对于Fe2+的螯合能耐

接管Decker等的方式妨碍测定。在各试管中退出区别品质浓度的洋葱黄酮类化合物溶液,比力用体积分数70%的乙醇,而后再分说退出0.1mL浓度为2妹妹ol/L的FeCl2以及0.2mL浓度为5妹妹ol/L的Ferrozine,最后各管用蒸馏水补足到5mL,室温部署20min,于波长562nm处测定吸光度,依据吸光度合计螯合率,同时用等品质浓度的EDTA替换样品作为阴性比力。

1.2.3.2 翦灭DPPH从容根基事

试管中挨次退出2.5mL浓度6.5×10-5md/L的DPPH溶液,区别品质浓度的洋葱黄酮类化合物溶液,比力用体积分数70%的乙醇,用体积分数50%的乙醇补足到4mL,各管混匀,避光20min后于波长517nm处测定吸光度,依据吸光度合计翦灭率,同时以等品质浓度的BHT替换样品作为阴性比力。

1.2.3.3 翦灭亚硝酸盐能耐

取5μg/mL的NaN022mL置于试管中,再退出区别品质浓度的洋葱黄酮类化合物溶液,比力用体积分数70%的乙醇,最后用蒸馏水补足到4mL,摇匀。反映10min后,各管退出品质分数0.4%的对于氨基苯磺酸2mL,摇匀,静置5min再退出品质分数0.2%的盐酸萘乙二胺1mL,摇匀,静置15min于波长538nm处测定吸光度,依据吸光度合计翦灭率。同时用等品质浓度的抗坏血酸替换样品作为阴性比力。

1.2.3.4 对于卵黄脂卵白脂质过氧化的抑制作用

用0.1mol/LpH值7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)配制体积分数3,85%的卵黄悬液,分说排汇卵黄悬液0.2mL,退出区别品质浓度的样品,比力为体积分数70%的乙醇。各管再退出0.2mL浓度为25妹妹ol/L的FeS04。用0.1mol/LpH值7.4的PBS填补至2mL,37℃恒温振荡15min。掏出后分说退出0.5mL品质分数20%的三氯乙酸(TCA),3500r/min离心10min。再分说排汇上清液2mL于试管中,退出品质分数0.28%的硫代巴比妥酸(TBA)1mL,加塞,放入滚水浴中15min。冷却后于波长532nm处测定吸光度,依据吸光度合计抑制率,同时以等品质浓度的BHT替换样品作为阴性比力。

1.2.3.5 对于油脂过氧化的抑制作用

称取大豆色拉油20.00g,3份,1份作空缺,此外2份分说退出品质分数0.02%的洋葱黄酮类化合物以及BHT,搅拌平均,于(60±1)℃去世板箱中强化保存。每一24h搅拌一次,并替换它们在去世板箱中的位置,于第三、六、九、十二、15天按GB/T5009.37-2003测定其过氧化值(POV),每一个样品平行测定3次。

2 服从与合成

2.1 对于Fe2+的螯合率

一些金属离子包罗F2+极易经由Fenton反映等浸染催化脂质、卵白质以及其余细胞组分氧化,造成细胞或者机关氧化伤害。因此,对于金属离子螯合率的测定也是评估抗氧化剂抗氧化功能罕用的方式。螯合率愈大,被评估的抗氧化剂潜在的抗氧化性就愈强。由图1可知,洋葱黄酮类化合物对于F2+具备较高的螯合率,随着洋葱黄酮类化合物资量浓度的增大,对于F2+的螫协浸染增强,在本试验条件下,洋葱黄酮类化合物对于F2+的螯合率优于阴性比力物EDTA。

2.2 对于DPPH从容基的翦灭率

DPPH从容基是一种晃动的从容基,其最大的罗致波长为517nm。DPPH从容基碰着提供质子的物资如抗氧化剂时就会被翦灭,呈现为吸光度的着落。基于这个道理,物资的抗氧化活性可能用其翦灭DPPH从容基的能耐来呈现。由图2看出。洋葱黄酮类化合物对于DPPH从容基具备较高的翦灭率,随着洋葱黄酮类化合物资量浓度的增大。对于DPPH从容基的翦灭浸染增强,泛起较好的量效关连。在划一条件下,洋葱黄酮类化合物对于DPPH从容基的翦灭率优于BHT。

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相干链接:洋葱2,6-二叔丁基-4-甲基酚(BHT)盐酸萘乙二胺氨基苯磺酸

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