指标

建树同时测定氢溴酸右美沙芬糖浆中主成份氢溴酸右美沙芬、法同腐剂杂质5-羟甲基糠醛及防腐剂苯甲酸、时测沙芬羟苯乙酯含量的定氢的含功能液相色谱方式。

方式

色谱柱为PhenomenexLunaC18（250妹妹×4.6妹妹，溴酸5μm），右美药及行动相为甲醇-0.1mol·L-1磷酸二氢铵溶液，糖浆梯度洗脱，中主杂质体积流量为1.0mL·min-1，降解及防柱温为30℃，法同腐剂检测波长为279nm，时测沙芬进样体积为20μL。定氢的含服从：氢溴酸右美沙芬、溴酸5-羟甲基糠醛、右美药及苯甲酸、糖浆羟苯乙酯的中主杂质线性畛域分说为29.21～876.二、1.94～58.2九、27.08～812.四、5.85～175.4μg·mL-1（r≥0.9997）。4种成份的平均加样接管率分说为99.23%、98.86%、100.3%、98.51%，RSD分说为1.03%、1.52%、1.11%、1.64%（n=6）。

论断

该方式啰嗦、精确，可用于测定氢溴酸右美沙芬糖浆中氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸以及羟苯乙酯的含量。

氢溴酸右美沙芬糖浆为中枢性镇咳药，可抑制延脑咳嗽中枢而产生镇咳浸染，临时服用无成瘾性以及耐受性。该药现行品质规范为国家药品规范WS1-（X-341）-2003Z，收载于《国家食物药品监督打点局国家药品规范新药转正规范》（第45册），该规范中惟独主成份氢溴酸右美沙芬的含量测定，并未对于杂质以及防腐剂妨碍品质操作。

《中国药典》2015年版四部规定糖浆剂中含蔗糖量应不低于45%，因此本品中含有高浓度的蔗糖，极易产生糖的降解杂质5-羟甲基糠醛（5-HMF）。5-HMF属于2类遗传毒性杂质，具备致突变性、致敏性以及遗传毒性等多种毒副浸染。当初遗传毒性杂质已经成为药品监管机构、制药企业以及医疗机构关注的焦点。

氢溴酸右美沙芬糖浆处方中还含有防腐剂苯甲酸或者羟苯乙酯，防腐剂虽可能抑制微生物在糖浆剂中愿望以及孳生，但过多摄入对于人体也会有未必的毒性，特意是儿童用药，如苯甲酸会侵害神经系统、具备细胞毒性以及致癌等。羟苯酯类影响男性繁殖系统以及引起女性乳腺癌等，故有须要对于氢溴酸右美沙芬糖浆中的降解杂质以及防腐剂的含量妨碍品质操作。本钻研建树HPLC法同时测定氢溴酸右美沙芬糖浆中的氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸以及羟苯乙酯的含量，有利于普及本制剂的品质操作规范。

1仪器与药品、试剂

1.1仪器

Waters2695功能液相色谱仪（含二极管阵列检测器）；WatersEmpower色谱使命站；SartoriusBP211D型电子合终日平；KH-700DE型数控超声波洗涤器。

1.2药品与试剂

氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸、羟苯乙酯比力品（纯度分说为94.8%、99.2%、99.9%、99.9%，批号分说为100201-20120四、111626-2019十二、100419-20170三、100847-201604）；氢溴酸右美沙芬糖浆（厂家A，19020二、19060二、19080二、200103，规格0.15%；厂家B，19020五、19030一、1904十一、190502，规格0.2%）；甲醇为色谱纯；磷酸二氢铵、磷酸为合成纯；水为超纯水。

2方式与服从

2.1色谱条件

色谱柱：PhenomenexLunaC18（250妹妹×4.6妹妹，5μm）；行动相：甲醇（A）-0.1mol·L-1磷酸二氢铵溶液（取磷酸二氢铵11.5g，加磷酸1mL，用水稀释至1000mL）（B）；梯度洗脱（0～10min，15%A；10～11min，15%A→50%A；11～26min，50%A；26～27min，50%A→15%A；27～35min，15%A）；检测波长：279nm；柱温：30℃；体积流量：1.0mL·min-1；进样体积：20μL。

2.2溶液的配制

2.2.1搅浑比力品溶液

分说详尽称取氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸、羟苯乙酯比力品过多，用甲醇-水（1∶1）消融配制成1.460四、0.0971五、1.3540、0.2924mg·mL-1的搅浑比力品蕴藏液；详尽量取该蕴藏液2mL，置10mL量瓶中，甲醇-水（1∶1）定容至刻度，摇匀，制成每一毫升分说含上述成份0.292一、0.0194三、0.270八、0.05848mg的搅浑比力品溶液。

2.2.2供试品溶液

详尽量取供试品5mL，置25mL量瓶中，加甲醇-水（1∶1）过多，超声解决10min，使消融并稀释至刻度，摇匀，滤过即患上。

2.2.3阴性样品溶液

以溶剂甲醇-水（1∶1）作为阴性样品溶液。

2.3专属性审核

取上述搅浑比力品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记实色谱图，服从见图1。

检测表明，5-羟甲基糠醛、苯甲酸、氢溴酸右美沙芬、羟苯乙酯均能达到基线别离，待测成份色谱峰的事实塔板数均大于3000，各成份之间无干扰，证实该方式专属性优异。

2.4线性关连审核

详尽量取搅浑比力品蕴藏液0.二、0.五、一、二、四、6mL，分说用甲醇-水（1∶1）定容于10mL量瓶中，摇匀，即患上系列搅浑比力品溶液。按“2.1”项的色谱条件对于上述系列搅浑比力品溶液妨碍测定，并绘制出横、纵坐标分说为品质浓度（μg·mL-1）以及峰面积（Y）的规范曲线，患上氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸以及羟苯乙酯的回归方程及线性畛域（n=6），分说为Y=6.6002×103X-2.2593×104（r=0.9998，29.21～876.2μg·mL-1）；Y=1.3768×105X-3.2880×104（r=0.9997，1.94～58.29μg·mL-1）；Y=7.3378×103X-1.8058×104（r=0.9998，27.08～812.4μg·mL-1）；Y=3.2497×104X-2.3063×104（r=0.9997，5.85～175.4μg·mL-1）。

2.5进样详尽度试验

取搅浑比力品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，陆续进样6次，记实峰面积，服从氢溴酸右美沙芬、5-羟甲基糠醛、苯甲酸以及羟苯乙酯峰面积的RSD分说为0.32%、0.46%、0.26%、0.37%，表明仪器详尽度优异。

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