一、鸡蛋及蛋聚氰指标要求

一、粉中学习及清晰功能液相色谱仪的测定使命道理及操作要点。

二、鸡蛋及蛋聚氰把握功能液相色谱法测定三聚氰胺的粉中道理及方式。

三、测定学会运勤勉用液相色谱仪、鸡蛋及蛋聚氰学会识别色谱图。粉中

四、测定把握固相萃取柱的鸡蛋及蛋聚氰运用方式。

五、粉中清晰三聚氰胺的测定源头、用途以及主要危害。鸡蛋及蛋聚氰

二、粉中试验道理

试样中的测定三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，提取液离心后经搅浑型阳离子替换固相萃取柱传染，洗脱物吹干后用行动相消融，勤勉用液相色谱仪妨碍测定。

三、试验试剂以及仪器

一、试剂

①甲醇：色谱纯。

②乙腈：色谱纯。

③氨水：浓度25％～28％。

④搅浑型阳离子替换固相萃取柱：60mg，3mL。

⑤三氯乙酸溶液(10g/L)：称取10g三氯乙酸，加水至1000mL。

⑥氨化甲醇溶液：精确量取5mL氨水以及95mL甲醇，混匀后备用。

⑦乙酸铅溶液(22g/L)：取22g乙酸铅，用约300mL水消融后定容至lL。

⑧滤膜：0.45μm，有机相。

⑨甲醇水溶液：50mL甲醇退出50mL水，混匀。

⑩离子对于试剂缓冲液：称取2.02g庚烷磺酸钠以及2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，加水消融稀释至刻度。

⑪三聚氰胺规范品：纯度＞99％。

A．三聚氰胺规范蕴藏液：称取lOOmg(精确到0.1 mg)的三聚氰胺规范品，用甲醇水溶液消融并定容于100mL容量瓶中，该溶液浓度为lmg/mL，于4℃避光保存，实用期3个月。

B．三聚氰胺规范中间液：排汇规范蕴藏液5.OOmL，于50mL容量瓶内，用甲醇水溶液定容至，50mL，该溶液i聚氰胺浓度为lOOμg/L，于4℃避光保存，实用期1个月。

C．三聚氰胺规范使命液：用行动相将三聚氰胺规范中间液逐级稀释患上到浓度为1．0μg/mL，5.0μL/mL，10μg/mL，25μg/mL，50μg/mL的规范使命液。

二、仪器

①功能液相色谱仪，配有紫外检测器或者二极管阵列检测器。

②离神思：转速不低于4000r/min。

③涡旋搅浑器。

④超声波洗涤器。

⑤氮气吹干仪。

⑥同相萃取装置。

四、试验步骤

一、提取

称取2.00g试样置于50mL具塞离心管中，精确退出20mL三氯乙酸溶液(10g/L)，退出

2mL乙酸铅溶液(22g/L)，摇匀，超声提取20min。静置2min，以不低于4000r/min离心10min，下层液待传染。

二、传染

分说用3mL甲醇，3mL水活化搅浑型阳离子替换固相萃取柱，精确移取10mL离心液分次上柱，操作过柱速率在1mL/min之内。挨次用3mL水以及3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。洗脱液500C下氮气吹干，残留物用1mL行动相定容，涡旋搅浑1min，过微孔滤膜后，供HPLC测定。同时做空缺试验。

三、功能液相色谱条件

①色谱柱：C8柱，柱长150妹妹，内径4.6妹妹，粒度5μm；或者功能至关的色谱柱。

②柱温：室温。

③行动相：离子对于试剂缓冲液(三、1．⑨)-乙腈(90:10)，混匀。

④流速：1.0mL/min。

⑤检测波长：240nm。

⑥进样量：20μL。

五、服从解决

              (8-16)

式中：X——试样中l一聚氰胺的含量，mg／kg；

A——样液中三聚氰胺的峰面积，积分单元；

c——规范溶液中j聚氰胺的品质浓度，μg/mL；

V——样液最终定容体积，mL；

As——规范溶液中三聚氰胺的峰面积，积分单元；

m——试样的品质，g；

f——稀释倍数。

六、留意事变

一、本方式的定量限为2mg/g。

二、接管率：在削减浓度2mg/kg～lOmg/kg浓度畛域内，接管率在80％～110％之间，相对于规范偏差小于10％。

三、详尽度：在重复性条件下取患上的两次自力测定服从的相对于差值不患上超过算术平均值

的10％。

参考资料：食物中有毒有害物资检测