已经知的真菌真菌毒素有数百种。主要产毒真菌为曲毒属、毒素的魔青霉属、真菌镰刀菌属的毒素的魔真菌以及其余菌属的真菌。曲霉毒素中最紧张的真菌是黄曲霉毒素。在潮湿燥热的毒素的魔季节，食粮、真菌油料及干果中很易生出黄曲霉毒素，毒素的魔何等多国家在玉米、真菌花生及花生油、毒素的魔花生饼、真菌花生酱、毒素的魔棉籽饼、真菌山核桃、毒素的魔无花果、真菌榛子、可可豆、杏仁、奶粉、牛奶、水牛奶、酸奶、奶酪、大米等都曾经查出黄曲霉毒素。日本及中国还曾经从发酵豆废品(如酱及酱油)中发现黄曲霉毒素。罕有真菌毒素见表。

一、黄曲霉毒素的魔难

黄曲霉毒素是黄曲霉以及寄生曲霉产生的一类结构相似的代谢搅浑产物，有17种之多，包罗B₁、B₂、G₁、G₂、M₁、M₂、P₁、Q、H₁、GM、B_2a以及毒醇。其根基结构都是二呋喃环以及香豆素，前者为根基毒性结构，后者为为致癌物。在紫内线下，黄曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₂发蓝色荧光，黄曲霉毒素G₁、黄曲霉毒素G₂发绿色荧光。黄曲霉毒素M₁是黄曲霉毒素B₁在体内经由羟化而衍天生的代谢产物。黄曲霉毒素的相对于份子品质为312～346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮以及氯仿等有机溶剂，但不溶于煤油醚、己烷以及乙醇中。平凡在中性及酸性溶液中较晃动，在pH 9～10的强碱溶液中分解迅速。黄曲霉毒素十分晃动，耐热，在熔点(200～300℃)之下不会分解(黄曲霉毒素B₁的分解温度为368°C，且其毒性十分强，主要伤害肝脏，使肝细胞坏去世、出血及胆管增生，有清晰的致癌浸染。

黄曲霉毒素常存在于土壤、动动物、种种坚果(特意是花生以及核桃)中，在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶废品、食用油、咸鱼等废品中也每一每一发现黄曲霉毒素。

黄曲霉菌的检测方式包罗：薄层色谱法（TLC）、功能液相色谱法（HPLC） (液-液提取以及固相提取)、微柱筛选法、酶送金疫吸附法皿ISA)、免疫亲以及柱-荧光分光光度法、免疫亲以及柱HPLC法等。TLC尽管合成老本较低，但操作步骤多，灵便度差；HPLC尽管灵便度高，但样品解决啰嗦，操作重大，仪器高尚。ELISA法重复性差，试剂寿命短，需要高温保存。此外，这些方式都具备如下配合的缺少之处：①在操作历程中，需要运用剧毒的黄曲霉毒素作为标定例范物，对于操作职员造成重大的危害；②在对于样品妨碍预解决历程中，需要运用多种有毒、异味的有机溶剂，不光危害操作职员，而且传染情景；③操作历程啰嗦，光阴长，劳动强度大；④仪器配置装备部署重大轻捷，难以实现现场快捷合成；⑤灵便度较差，无奈知足欧盟及其余一些国家以及区域的规范要求。

(一)微柱筛选法

一、道理

试样提取液经由由氧化铝与硅镁吸附剂组成的微柱色谱管，杂质被氧化铝吸附，黄曲霉毒素被硅镁吸附剂吸附，在365nm紫内线下呈蓝紫色荧光，其荧光强度在未必畛域内与黄曲霉毒素的含量成正比，因为微柱不能别离黄曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₂、黄曲霉毒素G₁、黄曲霉毒素G₂，故服从为黄曲霉毒素的总量。

二、试剂

①煤油醚：沸程60～900°C或者30～600°C。

②中性氧化铝：色谱用100～200目。

③酸性氧化铝：色谱用100～200目。

④无水硫酸钠：过40～80目筛或者80～100目筛。

⑤硅镁吸附剂：色谱用100～200目。

⑥甲醇水溶液：(55+45)。

⑦ 睁开剂：丙酮一三氯甲烷(1+9)。

⑧脂棉：用索氏提取器以二氯甲烷为溶剂提取2h后，挥干后储于瓶中保存。

⑨曲霉毒素B₁规范液：用苯-乙腈(98+2)配成0.4μg/mL的贮存液及0.1μg/mL的运用液，闭光冷藏。

注：色谱用氧化铝、硅镁吸附剂、无水硫酸钠应在120℃活化2h。

三、仪器

①紫外光灯：8～100W，带有波长365妹妹滤光片。

②内径0.4cm、长12cm的玻璃管，为加液不便上加一段粗管。

③微柱管架。

④微量注射器：50mL。

四、测定步骤

(1)提取

①食粮、花生及其废品：取破碎捣毁过筛(20目)试样20.00g于具塞锥形瓶中，加100mL甲醇水溶液，30mL煤油醚，密塞振摇30min，静置片刻，过滤于50mL具塞量筒中，收集50mL甲醇水溶液(留意切勿将煤油醚层带入滤液中)，转入分液漏斗中，加50mL硫酸钠溶液 (20g／L)稀释，加三氯甲烷10mL，轻摇2～3min，静置分层，三氯甲烷层经由装有5g无水硫酸钠的小漏斗脱水(以大批脱脂棉球塞住漏斗径口，并以大批三氯甲烷润湿)，并滤入10mL比色管中，再向分液漏斗中退出3mL三氯甲烷重提一次，脱水后滤入原比色管内，以大批三氯甲烷洗漏斗并定容至10.0mL，密塞，混匀，待测。此样液1mL至关于1.0g试样。

②动物油：称搅浑油样10.00g于20mL的烧杯中，用50mL煤油醚分数次洗入分液漏斗中，加50mL甲醇水溶液轻摇2～3min，静置分层，将下层甲醇水转入另一分液漏斗中，加50mL硫酸钠溶液(20g／L)稀释，加三氯甲烷10mL，如下按①中自“轻摇2～3min……”起依法操作。此样液1mL至关于1.0g试样。

③发酵酒、酱油、醋等水溶性试样：啤酒等含二氧化碳的试样，需在烧杯中于水浴上加热，搅拌，作废气泡，否则易乳化。称混匀试样20.00g于小烧杯中，以80mL硫酸钠溶液(20g/L)洗人分液漏斗中，加三氯甲烷10mL，此样液1mL至关于2.0g试样。

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