2服从与合成

2.1黑木耳胞外多糖红外光谱判断

每一升黑木耳发酵液能提取多糖244mg，黑木纯度为85.3%，耳胞FＴ-IR光谱呈现，外多黑木耳胞外多糖为具备典型β-吡喃糖结构的糖对重大多糖（图1），官能团合成表明，于小疫调影响在3419cm^-1处的鼠肠生态宽峰是-OH伸缩振动罗致峰，2973cm^-1以及2918cm^-1处的道微弱罗致带是-CH伸缩振动罗致峰，1735cm^-1以及1638cm^-1处的及免节罗致峰表明含有糖醛酸，1383cm^-1是黑木-CH笔直振动罗致峰，1078cm^-1以及1048cm^-1处的耳胞罗致峰是C-O-H以及C-O-C中的C-O引起的振动罗致；880cm^-1是β-糖苷键的特色罗致峰。

2.2黑木耳胞外多糖的外多单糖组成合成

黑木耳胞外多糖经由酸水解以及衍生化后，运用HPLC合成其单糖组成。糖对服从呈现，于小疫调影响葡萄糖以及木糖为其主要的鼠肠生态单糖组分（物资的量比为53.85%以及25.05%），尚有大批的道微甘露糖、果糖、岩藻糖、阿拉伯糖以及葡萄糖醛酸（表1）。与红外光谱合乐成果不同，黑木耳胞外多糖是由多种单糖组分组成的杂合多糖。

2.3黑木耳胞外多糖对于小鼠体重及脏体比的影响

与比力组比照，灌胃黑木耳胞外多糖后小鼠体重无清晰变换（图2）。脏器系数是反映动物器官发育的紧张指标，可直不雅反映受试物对于动物存在的危害浸染。本钻研经由称量小鼠各脏器机关品质，合计其脏器系数。黑木耳胞外多糖对于小鼠脏器系数的影响见表2，统计合成呈现，样品组与比力服从无清晰性差距（P＞0.05）。上述试验表明，灌胃黑木耳胞外多糖不会引起小鼠脏器爆发病理性颇为。

2.4黑木耳胞外多糖对于小鼠肠道菌群的影响

本试验运用微生物16SrRNA基因测序技术，探究了灌胃黑木耳胞外多糖小鼠肠道菌群的变换状态。测序所患上原始数据经筛选过滤后，对于取患上的序列妨碍可操作单元合成（OＴU）分开散漫，接管Greengenes数据库妨碍诠释，经由多种多变量统计学合成工具对于相同样本（组）微生物群落结构差距妨碍合成，患上到了小鼠肠道微生物16SrRNA在属水平OＴU序列的相对于品貌（图3）。经由Metastats对于样本组间序列量差距的比照魔难发现，与比力组比照，拟杆菌属以及罗氏菌属清晰削减（P＜0.05），拟杆菌属在多糖组肠道微生物群中占（10.31±1.5）%，而比力组为（5.4±1.38）%；罗氏菌属在多糖组中占（0.17±0.07）%，而在比力组中未检测到。

2.5黑木耳胞外多糖对于小鼠肠道短链脂肪酸含量的影响

肠道微生物经由伙食纤维的发酵以及短链脂肪酸（SCFAs）的产生来普及能量运用率，从而普及宿主代谢功能。本试验将小鼠粪便样品遵照冷冻去世板粪便样品，精确称取50mg样品，退出1.2mL磷酸盐缓冲液（pH7.3）混匀，4℃14000r/min离心20min，排汇上清液至5mL离心管中。每一200μL上清退出0.1mL的稀释后硫酸（体积分数50%），短缺混匀3min，用2mL二氯甲烷（色谱级）妨碍萃取，4℃静置2h，而后用0.22μm有机滤膜过滤。接管气相色谱（GC）检测样品中短链脂肪酸的含量，样品提取方式参照Zhao等并做全副更正。GC合成接管老例HP-FFAP（25m×0.32妹妹，0.5μm）配置装备部署柱，挨次设定参照贾益群等在生物样品脂肪酸提取与合成的钻研服从，并调整其分流比为20∶1。SCFA规范品溶液的配置装备部署以及规范曲线绘制参照孟拓等对于气相色谱-质谱联用法合成肠道炎小鼠短链脂肪酸代谢钻研服从。

申明：本文所用图片、翰墨源头《中国食物学报》，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割

相干链接：阿拉伯糖，二氯甲烷，甘露糖，β-吡喃糖