四、动物的测定钼锑抗比色法

一、全磷方式道理

动物中的动物的测定氮、磷因此有机态为主，全磷钾则以离子态存在。动物的测定用浓H₂SO₄-H₂O₂氧化剂消煮动物样品时，全磷其中的动物的测定有机物经脱水碳化、氧化分解，全磷酿成CO₂以及H₂0,动物的测定使有机氮以及磷转化为铵盐以及磷酸盐，可在对于立份消煮液中分说测定全氮、全磷磷、动物的测定钾(见磷、全磷钾测定)。动物的测定而且该消煮液对于热馏、全磷散漫以及比色等定氮方式均适用。动物的测定

消煮液中的铵盐在碱化后成为NH₃，经散漫(或者蒸馏)，用H₃BO₃溶液罗致，间接用规范酸溶液滴定，以甲基红一浪甲酚绿搅浑调唆剂调唆滴定尽头，即由蓝变萦红色。由此合计含氮量。

二、仪器及配置装备部署

分光光度计。

三、试剂

过氧化氢〔ω(H₂O₂) ≈30%，合成纯]。

四、操作步骤

（1）H₂SO₄-H₂0₂消煮：称取烘干、磨碎(0.25妹妹)动物样品0.3000g～0.5000g,置于50mL开氏瓶(或者消煮管)中(勿将样品粘附在瓶颈上)。先滴入少些水潮湿样品，而后加8mL浓H₂SO⁴，僻静摇匀(最佳部署住宿)，瓶口放一弯颈小漏斗，在电炉(或者消煮炉)上先文火消煮，待H₂SO₄分解冒少许白烟后再降高温度，当溶液呈平均的棕玄色时取下。稍冷后加10滴H₂O₂，摇匀，再加热至微沸，消煮约5min，取下，稍冷后，重复加H₂0₂5滴～10滴，再消煮。如斯重复共3次～5次，每一次削减的H₂0₂量应逐次削减，消煮到溶液呈无色或者清亮后，再加热约5 min～10min，以除了尽残余的H₂O₂(否则会影响N,P比色测定)。取下，冷却。用大批水冲洗弯颈漏斗，洗液流入开氏瓶。将消煮液无损地洗入100 mL容量瓶中，用水定容，摇匀。过滤或者部署廓清后供氮、磷、钾的测定。

（2）钼锑坑比色排汇待测液2.00mL～5.00mL(含P5μg～25μg)于50mL容量瓶中。称取经由100目((0.149妹妹)的烘干土壤样品0.2500g 置于铂坩埚中，此外称取研细的无水碳酸钠(试剂1) 2g，将其中的1.8g小心地用玻璃棒与样品短缺搅拌混匀，其余的碳酸钠铺盖于搅浑物外表，并僻静敲动坩埚，使外表摊平。将坩埚放入温电炉中，升温至900℃～920℃熔融，20min后掏出，趁热时揭盖审核熔块状态，若外表成凹形，颇色匀一，无气泡时则熔融已经残缺(若有红色原状碳酸钠或者外表高下不屈者，则呈现熔触尚不残缺，应不断熔5min～10 min)。待坩埚冷却至不太烫手时，益好坩埚盖，戴上手套，将坩埚僻静振拍，使熔块脱出(如熔块尚不能脱出，可用手僻静捏动坩埚周围，使熔块与坩埚脱离)。而后将熔块移入100mL高型烧杯中，盖上外表皿，小心地退出约10mL硫酸溶液(试剂2)消融熔块，并用热水洗净坩埚。将烧杯中的内容物洗入100 mL容量瓶中，用热水及橡皮头玻瑞棒洗净烧杯，洗涤液均倒入上述容量瓶中，冷却后定容，用去世板泥斗以及无磷滤纸过撼于三角瓶中。

排汇溶液5mL～10mL(含5μgP～25μgP)于50mL容量瓶中，加水稀释至约30 mL,加二硝基酚调唆剂2滴，用碳酸钠溶液[c(二分之一Na₂CO₃)=4mol·L^-1〕或者氢氧化钠溶液[c (NaOH )=2mol·L^-1〕及稀硫酸溶液[c(二分之一H₂SO₄)=0.5 mol·L^-1)〕调节pH至溶液刚呈微黄色。而后退出钼锑抗显色剂(试剂4)5mL,摇匀，用水定容。在室温高于15℃的条件下部署30min后，在分光光度计上用波长700nm(光电比色计用红色滤光片)比色，以空缺试验溶液为参比液调零点，读取罗致值，在使命曲线上查出显色液的Pmg·L^-1数。色调在8h内可连结晃动。

（3）使命曲线的绘制

分说排汇磷规范溶液(试剂7)0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、于50mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至约30mL，退出钼锑抗显色剂5mL，摇匀，定容。即患上0、0.1mg·L^-1、0.2 mg·L^-1、0.3 mg·L^-1、0.4 mg·L^-1、0.5 mg·L^-1、0.6 mg·L^-1规范系列溶液，与待测溶液同时比色，读取罗致值。在方格坐标纸上以罗致值为纵坐标，P mg·L^-1数为横坐标，绘制成使命曲线。

五、服从合计

稀释倍数为:

参考资料：土壤农业化学合成方式