2.3 固体发酵条件的茶籽优化

2.3.1 含水量

在上述筛选出的作育基配方的根基上，改动作育基的饼生含水量，作育后测定茶皂素含量并合计茶皂素降解率，物脱服从见图6。毒工从图6可能看出，艺的优化当含水量为40%～70%时，茶籽茶皂素降解率随着含水量的饼生削减而削减。当含水量为70%时茶皂素降解率最大，物脱达到60.97%；当含水量超过70%时，毒工茶皂素降解率清晰着落。艺的优化茶籽饼遇水易凝聚，茶籽含水量过高的饼生作育基易结块，菌体愿望会受到抑制；当含水量过低时，物脱作育基比照松散，毒工不能给菌体提供适量的艺的优化愿望情景。固体作育基的含水量是组成微生物愿望代谢情景的严主因素，因此抉择70%作为作育基的最佳含水量。

2.3.2 发酵光阴

区别发酵光阴对于茶皂素降解率的影响如图7所示。从图7可能看出，发酵早期随着光阴的削减，茶皂素降解率逐步削减，当发酵光阴为5 d时茶皂素降解率根基不发生变换，即作育基经由5 d发酵后，茶皂素降解率趋于晃动。因此，抉择5 d作为后续钻研的发酵光阴。

2.3.3 接种量

区别接种量对于茶皂素降解率的影响如图8所示。由图8可知，区别接种量对于茶皂素降解率影响清晰。当接种量为15%时，茶皂素降解率最大，达到66.19%；当接种量小于15%时，茶皂素降解率随接种量的削减而削减；当接种量大于15%时，茶皂素降解率随接种量的削减而着落。若接种量过大，发酵前期菌体总数大，菌体少许诺望使营养物资斲丧过快，且液体种子液的副产物过多，导致发酵延滞期缩短，从而引起相同的发酵周期茶皂素降解率着落。因此，抉择15%作为最佳接种量，用于后续钻研。

2.3.4 初始pH

区别初始pH对于茶皂素降解率的影响如图9所示。从图9可能看出，初始pH对于菌体愿望代谢的影响清晰，在未必畛域内随着作育基初始pH的着落，茶皂素降解率随之削减。当初始pH为6.5时，茶皂素降解率最大，达到67.85%。差此外微生物都有适应愿望的pH畛域及最适愿望pH，嗜酸小球菌的愿望pH偏酸性畛域，试验表明当初始pH处于酸性畛域内时，作育基中的茶皂素降解率大于初始pH处于碱性畛域内；若初始pH过高或者过低则会影响菌体内酶的活性以及晃动性，影响营养物资的消融度及微生物对于营养的罗致。因此，抉择6.5作为作育基的最佳初始pH。

2.3.5 种龄

区别种龄对于茶皂素降解率的影响如图10所示。从图10可能看出，当种龄为24 h时，茶皂素降解率最大，达到68.65%。当种龄较低时，菌体处于延滞期，导致细胞削减速率过慢，从而缩短了延滞期；当种龄偏高时，菌体老化，菌种精力削弱，代谢产物削减，从而缩短了发酵周期。因此，抉择24 h作为最佳种龄。

2.3.6 正交试验

接管正交试验法，抉择对于茶皂素降解率影响较大的因素(含水量、初始pH、接种量、种龄)妨碍4因素3水平L9(34)正交试验。正交试验服从见表2。

由表2可知，依据极差R巨细可知，各因素对于茶皂素降解率的影响从大到小挨次为含水量、初始pH、种龄、接种量。试验条件下最优组合为A3B1C3D2。发酵作育基的最优组合为茶籽饼85%、麦麸15%、葡萄糖3%、KH2PO4 0.1%、MgSO4·7H2O 0.15%、含水量70%，最佳作育条件为初始pH 6.0、接种量为20%、种龄为24 h、发酵光阴5 d、发酵温度32 ℃。在此工艺条件下，茶皂素降解率达到68.42%，比优化行普及了57.13%。

3 论断与品评辩说

微生物发酵法是茶籽饼粕降解的主要方式，被觉患上是当初发展后劲最大的茶籽饼粕脱毒解决方式。其道理是在茶籽饼粕中削减微生物妨碍发酵，使削减的微生物在发酵作育基上少许诺望并同时将茶皂素分解运用，从而着落茶皂素的含量，达到去毒的指标。微生物在发酵历程中产生包罗酶、匆匆愿望因子以及抗菌物资等有利的代谢产物，同时着落了茶籽饼粕中的单宁以及纤维素等抗营养因子，加之运用的发酵微生物菌种自身是动物益生菌，能起到改善动物肠道微生态失调的浸染。

该试验以茶籽饼为质料，对于茶籽饼生物脱毒及其发酵工艺妨碍钻研。经由单因素试验以及正交试验审核了茶籽饼粕削减量、碳源、氮源、有机盐种类及削减量、含水量、初始pH、种龄、接种量、发酵光阴等因素对于茶皂素降解率的影响，优化了发酵作育基的组成及发酵条件，最终患上到最佳脱毒工艺条件。

该试验服从表明，在茶籽饼脱毒历程中含水量与初始pH是影响茶皂素降解率的严主因素，茶籽饼与麦麸的削减比例85∶1五、葡萄糖3%、KH2PO4 0.1%、MgSO4·7H2O 0.15%、含水量70%，最佳作育条件为初始pH 6.0、接种量20%、种龄24 h、发酵光阴5 d、发酵温度32 ℃。在此条件下茶皂素降解率为68.42%。在此工艺条件下，固态发酵作育基配制实现后无需灭菌，这在未必水平上着落了能耗，且操作重大，对于配置装备部署要求低，着落了斲丧老本，为茶籽饼生物脱毒技术的推广提供了技术反对于。

申明：本文所用图片、翰墨源头《生物工程学报》2021年2月，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割

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