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一株高产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌别离及产酶优化条件(三)

发表于 2024-10-17 17:29:56 来源:饕餮之徒网

2.3 作育条件对于解淀粉芽孢杆菌F3菌株纤维素酶活性的株高影响

2.3.1 作育光阴的影响

F3菌株经LB液体作育基活化后,按4%接种量接种至LB液体作育基,产纤产酶37℃陆续作育72h,维素区别光阴点的解淀菌别纤维素酶活性服从如图5所示。

由图5可知,粉芽随着作育光阴的孢杆缩短,F3菌株纤维素酶活性呈回升趋势,离及48h时酶活性最高,优化纤维素酶精力为15.97U/mL,条件随后纤维素酶活性呈着落趋势,株高故最佳作育光阴判断为48h,产纤产酶这区别于其余钻研报道中芽孢杆菌纤维素酶精力最佳作育光阴3d~4d。维素

2.3.2 作育温度的解淀菌别影响

活化的F3菌株按4%接种量接种至LB液体作育基,区别作育温度下F3菌株纤维素酶精力的粉芽变换服从如图6所示。随着温度的孢杆着落,F3菌株产纤维素酶的精力呈先回升再着落的趋势,其中仍以37℃作育温度条件下酶精力最高,但35℃与37℃两种作育温度对于F3菌株纤维素酶精力的影响差距不清晰(p>0.05),其产纤维素酶的最佳作育温度与其余钻研报道的解淀粉芽孢杆菌存在较大差距,诠释温度对于解淀粉芽孢杆菌纤维素酶精力的影响具备清晰的菌株特同性。

2.3.3 接种量的影响

F3菌株经活化后,分说按区别接种量接种至LB液体作育基中37℃作育48h,纤维素酶精力检测服从如图7所示。接种量为6%时,F3菌株的纤维素酶精力最高为17.62U/mL,但与4%接种量时其酶精力差距不清晰(p>0.05),这与其余钻研报道相似。

2.3.4 作育基初始pH对于F3菌株纤维素酶活性的影响

活化的F3菌株分说按6%接种量接种至区别初始pH的LB液体作育基中,37℃作育48h,纤维素酶精力检测服从如图8所示。

由图8可知,作育基初始pH对于F3菌株产纤维素酶的精力影响清晰,其中以初始pH为pH7.0时纤维素酶精力最高,达18.22U/mL,清晰高于此外初始pH时菌株所产的纤维素酶精力(p<0.05)。此外,从区别初始pH条件下菌株的愿望状态看,初始pH为pH11.0时,F3菌株的作育液相对于廓清,这诠释F3菌株不适量在pH11.0的碱性条件愿望,这也导致了此条件下其产酶能耐最弱。比照于pH7.0条件,F3菌株在pH3.0的酸性条件下长势也不强,但仍具备未必的酶活性,而何颂捷等报道的解淀粉芽孢杆菌在pH3.0的初始pH下不能愿望,故无纤维素酶活性。由此诠释,F3菌株更适量在中性条件下愿望。

2.4 解淀粉芽孢杆菌F3产纤维素酶条件优化

依据单因素试验服从,遵照表1落选取的因素及水平,妨碍正交试验优化,服从如表2所示。4种因素对于F3菌株产纤维素酶精力的影响巨细挨次挨次为:作育基初始pH>作育光阴>作育温度>接种量,纤维素酶精力优化的最佳组合为A2B2C2D3。遵照最佳组合的作育条件妨碍作育,即LB液体作育基的初始pH调至pH7.0,按6%接种量接种F3菌株,在37℃作育温度下陆续作育60h,解淀粉芽孢杆菌F3菌株作育液中纤维素酶精力可达21.14U/mL,比照于正交试验优化前最高酶活普及了16.03%。F3菌株所产纤维素酶的精力清晰高于林晓琼等报道的解淀粉芽孢杆菌,具备潜在的运用价格。

3 论断

从人造界中发掘具备纤维素酶活性的微生物菌种资源具备紧张意思。文中从发酵豆豉中别离到一株可产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌动物亚种F3菌株,经由单因素及正交试验优化了其液体作育的最佳产酶条件,即作育温度37℃、接种量6%、初始pH为pH7.0、发酵光阴60h,纤维素酶精力可达21.14U/mL。

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