(4)免疫亲以及色谱柱的免疫再生与贮存农药残留免疫亲以及色谱柱的再生个别接管未必体积的极性有机溶剂(如甲醇等)洗柱，作废非特同性吸附的亲及杂质，而后再用10～15倍柱体积的色谱术失调缓冲液冲洗免疫亲以及色谱柱。在以及顺条件下，份印免疫亲以及色谱柱可再生运用一再。迹技暂不用运历时，免疫可用含0.02％叠氮化钠或者0.01％硫柳汞的亲及失调缓冲液失调色谱柱，于4℃冰箱中保存。色谱术

(三)免疫亲以及色谱技术在农药残留合成中的份印运用

当初外洋曾经钻研开辟了多种农药的免疫亲以及色谱技术。Lawrence等(1996)接管免疫亲以及色谱反相液相色谱联用检测萝b、迹技玉米、免疫草莓等样品中残留的亲及苯基脲类除了草剂，检测灵便度可达2～5μg／kg，色谱术远低于老例功能液相色谱的份印检测限0.1mg／L。David等(1996)将瓜果提取液中残留的迹技多菌灵用免疫亲以及色谱柱传染稀释，洗脱液接管功能液相色谱法检测，检测限可达0.1μg／kg。Rejeb等(2001)接管免疫亲以及色谱别离富集小麦、玉米、羊尿等样品中残留的咪唑啉酮类除了草剂以及花生中残留的噻氟菌胺(thifluzamide)，Spinks等(1999)接管免疫亲以及色谱别离富集除了草剂百草枯，均取患了优异的别离富集以及检测成果。

我国农药免疫亲以及色谱技术钻研未多少，刘曙照等在我国当先建树了克百威(2005)、三唑磷(2006)以及氯磺隆(2006)免疫亲以及色谱功能液相色谱联用(IAC-HPLC)技术，分说用于情景水、稻米以及农田土壤中克百威、三唑磷以及氯磺隆残留的别离富集、定性检测以及定量检测。免疫亲以及色谱柱容量达1.58～2.6μg／mL柱体积，对于指标合成农药的富集倍数为160～250，接管率为90%～102％，经免疫亲以及色谱别离传染的样品中简直不干扰功能液相色谱检测的杂质，清晰优于固相萃取法的别离纯化与富集成果。

(四)免疫亲以及色谱技术需要进一步解决的成果以及发展偏差

在农药残留合成中，免疫亲以及色谱主要作为样品提取液中痕量农药残留的功能别离富集伎俩，而后与功能液相色谱、气相色谱等方式联用妨碍检测，深受农药残留合成机谈判技术职员的招待。

尽管，免疫亲以及色谱技术的开辟运用中也存在一些规模性：①作为免疫亲以及色谱固相基质配体的抗体，其素质是具备生物活性的免疫球卵白，对于有机溶剂、盐浓度、pH、温度等条件的耐受畛域有限，在运用历程中重大患上到活性，限度了免疫亲以及色谱的运用畛域以及运用寿命；②当初所运用的免疫亲以及色谱柱需要实用防御固相基质对于非指标合成物的非特同性吸附；③免疫亲以及色谱牢靠相制备需要较多的纯化抗体，面临较高的老本压力；④当初已经钻研开辟的免疫亲以及色谱牢靠相耐压性有限，还难以间接用作功能液相色谱柱妨碍在线合成。

因此，免疫亲以及色谱技术需要进一步解决的成果是：运用今世迷信技术，研制能在比照厚道的条件下连结高免疫活性的抗体；研制不外特同性吸附、耐压性强、理化功能晃动、与配体相容性好的固相基质；优化配体与基质的耦联方式，普及免疫亲以及色谱柱容量；研制免疫亲以及色谱柱晃动剂，缩短色谱柱的运用寿命，削减免疫亲以及色谱柱的重复运用次数，着落运用老本；使免疫亲以及色谱从纯挚的样品前解决向在线合成偏差发展；将多种抗体或者簇特同性抗体牢靠于固相基质，制备多配体或者簇特同性免疫亲以及色谱柱，对于多种指标合成组分同时妨碍别离富集，使单组分免疫亲以及色谱技术向多组分免疫亲以及色谱技术发展。

二、份子印迹技术

(一)份子印迹技术道理

份子印迹技术(molecular imprinting technique，MIT)因此在空间结谈判散漫位点上与指标合成物相立室、对于指标合成物具备抉择性可逆散漫能耐的高份子聚合物为受体(也被称为家养分解抗体)的别离合成技术。

建树农药份子印迹技术的根基是制备对于指标合成农药具备抉择性可逆散漫能耐的份子印迹聚合物。以指标合成农药份子为模版，妄想、分解或者抉择与指标合成农药在份子结构、份子问浸染力等方面相立室的功能单体[如甲基丙烯酸(methylacrylic acid，MAA)、4-MAA)、乙烯基安眠香酸等]，将功能单体与模版份子在适量溶剂中散漫组成复合物(如甲基丙烯酸与氯三嗪、4-乙烯基吡啶与2，4-滴、4-乙烯基吡啶与吲哚乙酸、三氟甲基丙烯酸与甲磺隆、乙烯基安眠香酸与有机磷农药的复合物等)，而后抉择适量的交联剂[如二甲基丙烯酸乙二醇酯(ethyleneglycol dimethacrylate，EGDMA)、季戊四醇三丙烯酸酯等]，在适量引起剂[如偶氮二异丁腈(azobisisobtltylnitrile，AIBN)等]引起下将功能单体相互交联起来，使功能单体与模板份子相立室的功能基团以及空间结构患上以牢靠，组成晃动的份子印迹聚合物。最后接管强极性溶剂一再萃取、索氏提取怜惜复回流萃取等方式，将聚合物中的模板份子脱除了，这样就在聚合物上留下了以及模板份子在空间结谈判散漫位点相立室的三维空穴，这样的空穴可能重新抉择性地与模板份子散漫。

(二)份子印迹技术的运用现状以及特色

当初，份子印迹技术在农药残留合成中主要用于重大样品中指标合成农药的别离、富集与传染。用针对于指标合成农药的份子印迹聚合物制备固相萃取柱，将提取液过柱，样品中的指标合成农药入抉择性地保存在聚合物的空穴中，而后用大批洗脱剂洗脱指标合成农药，达到抉择性别离、富集以及传染的指标。从柱中洗脱的指标合成农药可接管区别方式妨碍检测，实现对于重大样品中痕量指标合成农药的高灵便度合成。也有大批运用份子印迹聚合物聚合物柱妨碍在线色谱别离合成的报道。

份子印迹聚合物是家养分解的，具备未必的抉择性识别能耐以及与高份子物资同样的抗侵蚀、耐高温、耐有机溶剂等短处，因此可运用于生物工程、临床医学、情景监测、食物工业等泛滥畛域，克制了人造抗体的规模性，在农药残留合成、特意是脂溶性农药残留合成中具备清晰的劣势。已经报道的农药份子印迹技术钻研主要会集于三嗪类除了草剂，其余尚有2，4-滴、甲磺隆、吲哚乙酸以及少数有机磷杀虫剂。

份子印迹技术当初存在的主要成果是，现有份子印迹聚合物的三维空穴与模板份子在空间结谈判散漫位点的适宜上还远达不到抗原抗体散漫的详尽水平。因此份子印迹聚合物对于指标合成物的识别能耐还远达不到抗体坚持原的特同性识别水平。份子印迹聚合物对于非指标合成物的非特同性吸附也是干扰份子印迹技术运用的主要成果之一。

份子印迹技术的中间是份子印迹聚合物的制备。妄想研制可能与模板份子详尽立室的功能单体、钻研制备自身不产生非特同性吸附的功能交联剂、优化份子印迹聚合物制备技术、消除了份子印迹聚合物的非特同性吸附是解决份子印迹技术现存成果的紧张。

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相干链接：苯基脲类，咪唑啉酮类，吲哚乙酸，甲磺隆