1 资料与方式

1.1 供试土壤

试验位置于江西省鹰潭市余江县邓家埠水稻原种场(116°55'E，秸秆28°15′N)，配施该区域属于典型中亚热带潮湿季风气候区，氮肥对于的影月平均最高气温与最低气温分说为29.9℃ 以及 5.5℃，还田活性年均温度 17.6℃，水稻整年实用积温 6 480℃，土酶年均降雨量 1 727 妹妹，秸秆整年无霜期 289 d。配施当地连作方式为：早稻–晚稻–夏日休闲。氮肥对于的影本试验供试稻田土壤属于河流冲积物发育而成的还田活性潴育型水稻土，供试资料早稻种类为中早 33，水稻晚稻种类为农香 98，土酶株行距 20 cm × 20 cm。秸秆2008 年晚稻种植前，配施土壤基
础营养含量为有机碳 19.20 g/kg、氮肥对于的影全氮 1.64 g/kg、全磷 0.30 g/kg、全钾 27.26 g/kg、碱解氮 139.04 g/kg、速效磷 5.76 mg/kg、速效钾 81.60 mg/kg，pH 为 4.94。

1.2 试验妄想 

试验接管两因素残缺随机区组的裂区妄想，主区解决：①夏日还田(WS)；②春天还田(SS)；副区解决：①秸秆还田，试验期内全程不削减矿质氮 (N0)；②老例施肥，还田时不削减矿质氮(NB)；③还田时削减早稻基肥用量的 30% 矿质氮(N30B)；④还田时削减早稻基肥用量的 60% 矿质氮 (N60B)；⑤秸秆移除了(CK)； 3 次重复，共 30 个小区，小区面积为 10 m × 8 m。

秸秆还田解决是将晚稻收获的全副稻草破碎捣毁至5 ~ 10 cm，平均散漫于田面，并按主区解决分说在夏日(12 月中旬)或者春天犁田(来年 4 月中旬)时将田面秸秆翻入小区耕层土壤中，秸秆还田量为 7 500 kg/hm2。秸秆移除了解决是将晚稻收获的全副稻草移出小区，秸秆不还田，秸秆解决与移除了解决的留茬高度均为 10 cm左右。 

早稻施肥量氮肥为 N 180 kg/hm2，磷肥为 P2O5 75 kg/hm2，钾肥为 K2O 150 kg/hm2，所用的肥料氮肥为尿素，磷肥为钙镁磷肥，钾肥为氯化钾；磷肥作为基肥一次性施入，钾肥按基肥︰分蘖肥︰穗肥 = 3︰ 4︰3 施入。老例施肥的 NB 解决按基肥︰分蘖肥︰穗 肥 = 5︰3︰2 施入，其余不施氮肥以及基肥氮前施的解决其氮肥施用妄想详尽见表 1。

1.3 取样与测定

2013 年晚稻收获后，在水稻冬闲期(11 月至次年4 月)内共取 4 次样，分说于 1—4 月的 10 号定期妨碍取样(夏日秸秆翻耕在 2014 年 1 月 10 日)，记作：冬闲Ⅰ、冬闲Ⅱ、冬闲Ⅲ 以及冬闲 Ⅳ；在 2014 年早稻生养期(4 月中旬至 7 月中旬)的分蘖期、拔节期、齐穗期以及成熟期各取一次。

样品网络于 0 ~ 15 cm 的耕层土壤，每一个小区按“S”形 5 点采样并混匀。土样部署于冰桶中，迅速带回试验室，拣去土壤中的可见根系、秸秆等杂质后，置于冰箱 –20℃ 冷冻保存，用于土壤酶活性的测定。

1.4 测定名目及方式

蔗糖转化酶(INV)活性的测定：接管改善的二硝基水杨酸比色法测定蔗糖转化酶的活性。土壤与蔗糖在 50℃下作育 3 h，测定其复原糖监禁数目，蔗糖转化酶活性以每一克土壤每一小时葡萄糖毫克数呈现(mg/(g·h)，50℃，3 h)。

β-葡萄糖苷酶(BG)、β-纤维二糖苷酶(CEL)、β-木糖苷酶(BXYL)、多酚氧化酶(PHOX)以及过氧化物酶(PEOX)的活性合成接管荧光微型板检测技术。4-羟甲基-7-香豆素(MUB)在 365 nm 波短处激发，能在
460 nm 处检测到荧光，它与某些物资(比喻 β-D-纤维二糖)散漫荧光特色消逝，经由酶的水解特色将 MUB监禁进去，经由检测荧光量来表征酶的活性。

首先对于 96 孔微型板遵照区别测定的酶妨碍编号、分区，玄色以及红色微型板(其中，玄色微型板测定非氧化复原酶活性，红色微型板测定氧化复原酶活性)分为缓冲液+缓冲液区、缓冲液+规范底物区、缓冲液+荧光底物区、待测液+缓冲液区、待测液+规范底物区、待测液+荧光底物区；其次为制备土壤悬浊液试剂：称取至关于 1 g 干土的鲜土，置于 250 ml灭菌红色塑料瓶中，退出缓冲液 125 ml，震撼制备成土壤悬浊液作为待测液；而后将配置装备部署好的缓冲液、待测液用 8 通道移液枪遵照挨次退出曾经编号分区的微型板中，最后将配置装备部署好的规范底物退出微型板，迅速退出荧光底物溶液，将微型板放入 25℃ 的作育箱黝黑作育，其中黑板作育 4 h 后上机测定(测定前加10 μl 0.5 mol/L NaOH 溶液结束反映)，白板作育 20 h上机测定。

1.5 统计合成

酶活性测定每一个样品配置 8 个平行，运用平行数值求平均值，每一个样品取患上一个测定值，而后运用SPSS19.0 软件妨碍解决间的方差合成。

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