一、抗氧概述

同样平凡生涯中常碰着这样的化剂天气：含油脂的的食物会酸败、裼变、测定变味儿，抗氧而导致食物不能食用。化剂其原因是测定食物在贮存历程中，发生了一系列的抗氧化学变换、生物变换，化剂特意是测定氧化反映。即在酶或者某些金属的抗氧催化浸染下，食物中所含的化剂易于氧化的成份与空气中的氧发生反映，天生醛、测定酮、抗氧醛酸、化剂酮酸等一系列哈败物资，测定这个历程称为油脂的酸败。防御油脂酸败的紧张是防御食物的自身氧化。为克制或者延迟食物氧化，普及食物的晃动性以及缩短食物的保鲜期而退出的食物削减剂称为抗氧化剂。

抗氧化剂的种类良多，按其浸染机理区别分为：抗氧化剂斲丧食物机关中的氧，自身被氧化，而食物机关被呵护；抗氧化剂提供电子或者氢离子，中断食物机关氧化反映的链式反映，食物机关被呵护；抗氧化剂抑制食物自身氧化反映所需氧化酶的活,食物机关被呵护。

按消融性分类有油溶性与水溶性两类：油溶性的如丁基羟基茴香醚(BHA)、2，6-二叔丁基对于甲酚(BHT)、叔丁基对于苯二酚(TBHO)、没食子酸丙酯(PG)、维生素E等；水溶性的有异抗坏血酸及其盐类、EDTA-2Na等。

按源头分类可分为人造与家养分解两类：人造的如DL-α-生养酚、茶多酚(PT)等；家养分解的有叔丁基羟基茴香醚等。

我国GB 2760—2011《食物牢靠国家规范 食物削减剂运用规范》规定，BHA与BHlT径从容食物中的最大运用量为0.2g/kg；除了在胶基糖果中最大运用量为0.4g/kg；PG在食物中径自最大运用量为0.1g/b(除了胶基糖果中最大运用量为0.4g/kg)，与BHA以及BHT搅浑运历时，不患上超过0.1g/kg。

抗氧化剂的测定方式有气相色谱法、薄层色谱法以及分光光度法等。

二、叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2，6-二叔丁基对于甲酚(BHT)的测定

(一)气相色谱法

一、道理

样品中的叔丁基羟基茴香醚(BHA)以及2，6-二叔丁基对于甲酚(BHT)用煤油醚提取，经由层析柱使BHA与BHT传染，稀释后，经气相色谱别离后用氢火焰离子化检测器检测，依据样品峰高与规范峰高比照定量。

二、仪器以及试剂

(1)仪器

①气相色谱仪：FID检测器。

②旋转蒸发器：容积200mL。

③振荡器。

④层析柱：lcm×30cm玻璃柱，带活塞。

⑤气相色谱柱：长1.5m，内径3妹妹的玻璃柱。

(2)试剂

④煤油醚：沸程30～60℃。

②二氯甲烷、二硫化碳、无水硫酸钠。

⑧硅胶G：60～80目，于120℃活化4h，放去世板器备用。

④弗罗里硅土(Florisil)：60～80目，于120⁰C活化4h，放去世板器中备用。

⑤BHA、BHT搅浑规范蕴藏液：精确称取BHA、BHT各0.1000g，搅浑后用二硫化碳消融，

定容至100mL，此溶液分说为每一毫升含1.0mg BHA、BHT，置冰箱中保存。

⑥)BHlA、BHT搅浑规范运用液：排汇规范蕴藏液4mL于100mL容量瓶中，用二硫化碳定容至100mL，此溶液分说为每一毫升含0.040mgBHA、BHT，置冰箱中保存。

三、操作步骤

(1)样品的解决

称取0.5kg含油脂较多的样品，1kg含油脂少的样品，而后用对于角线取1/二、l/3或者依据样品状态取具备代表性的样品，在玻璃乳钵中研碎，搅浑平均后部署广口瓶内，于冰箱中保存。

(2)脂肪的提取

①含油脂高的样品(如桃酥等)：称取50.0g，搅浑平均，置于250mL具塞锥形瓶中，加50mL煤油醚(沸程为30～60℃)，部署住宿，用快捷滤纸过滤后，减压接管溶剂，残留脂肪备用。

②含油脂中等的样品(如蛋糕、江米条等)：称取100g左右，搅浑平均，于500mL具塞锥形瓶中，加100～200mL煤油醚(沸程为30～60⁰C)，部署住宿，用快捷滤纸过滤后，减压接管溶剂，残留脂肪备用。

③含油脂少的样品(如面包、饼干等)：称取250～300g搅浑平均后，于500mL具塞锥形瓶中，退出过多煤油醚浸泡样品，部署住宿，用快捷滤纸过滤后，减压接管溶剂，残留脂肪备用。

(3)层析柱的制备

于色谱柱底部退出大批玻璃棉，大批无水硫酸钠，将硅胶-弗罗里硅土(6+4)共10g，用煤油醚湿法搅浑装柱，柱顶部再退出大批无水流酸钠。

(4)试样的制备

①试样制备：称取制备好的脂肪0.50～1.00g，用25mL煤油醚消融，移入上述层析柱上，再以100mL二氯甲烷分5次淋洗，并吞淋洗液．减压稀释近干时，用二硫化碳定容至2mL，该溶液为待测溶液。

②动物油试样的制备：称取搅浑平均样品2.00g放入50mL烧杯中，加30mL煤油醚消融，转移到上述层析柱上，再用10mL煤油醚分数次洗涤烧杯并转移到色谱柱，用100mL二氯甲烷分5次淋洗，并吞淋洗液，减压稀释近干，用二硫化碳定容至2mL，该溶液为待测溶液。

(5)测定

①气相色谱参考条件

色谱柱：长1.5m，内径3妹妹的玻璃柱，10％(m/m)QF-1 GasChrom Q(80～100目)。

检测器：FID。

温度：检测室200⁰C，进样口200⁰C，柱温140℃。

气体流量：氮气70mL/min；氢气50mL/min；空气500mL/min。

②注入气相色谱3μL规范运用液，绘制色谱图，分说量取各组分峰高或者面积，进3μL样品待测溶液(应视样品含量而定)，绘制色谱图，分说量取峰高或者面积，与规范峰高或者面积比照合计含量。

参考资料：食物中有毒有害物资检测

相干链接：抗氧化剂，丁基羟基茴香醚，异抗坏血酸