2 服从与品评辩说

2.1 单因素试验服从

2.1.1 洗脱液比例对于洗脱历程的中性影响

上样量3g，洗脱流速2mL/min，氧化钻研洗脱液比例(V_二氯甲烷:V_无水甲醇)对于中性氧化铝柱合因素袂纯化鲨肝醇的铝柱浸染成果。

由图1可知，层析纯化醇废成合成鲨肝醇纯度随着洗脱剂比例的别离削减呈先回升后着落的趋势。在抉择洗脱液时，鲨肝平凡先抉择极性较小的品及溶剂，依据别离成果再挨次增大极性。其组本试验中甲醇的中性极性要大于二氯甲烷。当仅抉择二氯甲烷为洗脱剂时，氧化其别离成果要弱于二氯甲烷与甲醇(体积比9:1)复配运用，铝柱其原因可能是层析纯化醇废成合成二氯甲烷的极性弱，无奈很好地别离鲨肝醇。别离而随着甲醇比例的鲨肝削减，鲨肝醇的品及纯度不断着落，这是因为复配洗脱剂的极性过强而将全副杂质混入鲨肝醇中。最终选定洗脱剂比例(V_二氯甲烷:V_无水甲醇)为9:1妨碍优化，此时第7管鲨肝醇纯度最高。

2.1.2 上样量对于洗脱历程的影响

洗脱液比例(V_二氯甲烷：V_无水甲醇)为9:1，洗脱流速为2mL/min，钻研上样量对于中性氧化铝柱别离、纯化鲨肝醇的浸染成果。

由图2可知，上样量在1～3g畛域，鲨肝醇纯度随上样量的削减而削减，可是上样量不断削减,鲨肝醇纯度呈着落的趋势。这一论断与龚金炎等的钻研服从根基不同。合成其原因可能是：当上样量过低时，氧化铝层析柱无奈被短缺运用而造成浪费，同时洗脱剂斲丧量大，使不皂化物中的鲨肝醇与杂质无奈实用别离：而当上样量过大时，极易造成氧化铝层析柱负载过大，吸附功能着落。接管上样量3g妨碍后续优化。此外，在色谱柱负载量0.012g/g氧化铝、上样量3g时，第7管鲨肝醇纯度最高。

2.1.3 洗脱流速对于洗脱历程的影响

洗脱液比例(V_二氯甲烷：V_无水甲醇)为9:1，上样量为3g，钻研洗脱流速对于中性氧化铝柱别离、纯化鲨肝醇的浸染成果。

由图3可知，鲨肝醇纯度随洗脱流速的着落呈先削减后减小的趋势。合成原因可能是：在较低洗脱流速下，鲨肝醇在氧化铝层析柱中勾留光阴变长，而中性氧化铝具备很强的吸附浸染，从而导致全副鲨肝醇被吸附在层析柱中而无奈被洗脱；当洗脱流速过高时，不皂化物快捷流过层析柱而使鲨肝醇与杂质无奈实用别离。宋恭帅等觉患上柱层析洗脱流速在1～2mL/min之间为宜。本钻研服从与之不同。最终选定2mL/min为最佳洗脱流速。此外，在洗脱流速为2mL/min时，第7管鲨肝醇纯度最高。

2.2 响应面试验

2.2.1 模子拟合

响应面试验妄想及服从见表2。

对于表2中数据妨碍多元二项式回归拟合。患上到洗脱液比例A、上样量B、洗脱流速C与鲨肝醇纯度之间的二次多项回归方程为：

鲨肝醇纯度=18.08+0.84A+0.47B-0.84C+0.71AB+0.874AC+1.04BC-2.01A²-1.66B²-2.02C²。

由表3可知，二项式回归方程的F值为35.57，其P值＜0.0001，差距极清晰；对于方程妨碍失拟项魔难。F值为2.46，其P值为0.2020＞0.05。不清晰；从拟合方程的关连系数可见，多元二次方程拟合关连系数高于0.90，因此拟合的回归模子坚贞，可用来预料响应值与反映参数之间的关连。此外，A、B、G、A二、B2以及C2的P值均小于0.05，诠释它们对于试验服从影响清晰，且洗脱液比例A是影响鲨肝醇纯度的最主要因素。

相干链接：二氯甲烷，氧化铝柱，甲醇

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