2.5区别加工方式对于石斛碱的药用影响

石斛个别以其别致或者去世板茎入药，对于其加工方式主要有煎煮、石斛属动榨汁、物石去世板、斛碱润蒸、钻研破碎捣毁以及制成种种石斛药品或者石斛保健品，妨碍如复方石斛片、药用石斛夜光丸、石斛属动石斛花茶等。物石差此外加工方式会导致石斛废品中药效成份含量的斛碱区别。朱南南等钻研发现，钻研贵州赤水4个基地的妨碍金钗石斛干品以及鲜品中石斛碱含量各有高下，但经由配对于t魔难解决，药用发现部份上差距不清晰；钱桂敏等钻研发现，石斛属动差此外去世板方式对于金钗石斛中石斛碱含量影响挨次为冷冻去世板法(0.45%)＞传统烘干法(0.43%)＞热风循环去世板法(0.42%)；黎恩立初次对于金钗石斛妨碍超微破碎捣毁加工，物石服从发现，超微粉以及平凡粉的多糖溶出率分说为0.2848g/g以及0.1936g/g，而石斛碱的溶出率分说为0.0035g/g以及0.0033g/g；孙芸等在小议石斛的煎煮方式时提到，石斛中的实用成份主要为难溶于水的生物碱，故为了普及石斛的临床疗效，倡导在煎药时先煎1～2h后再与其余药一起煎煮，省患上造成不用要的浪费；欧德明等钻研发现，区别炮制方式对于石斛碱含量的影响挨次为白酒润蒸(0.28%)＞蒸废品(0.23%)＞黄酒润蒸(0.23%)＞黄酒炙品(0.22%)＞白酒炙品(0.22%)＞石斛干品(0.18%)。

由此可见，酒是较好的溶剂，能清晰普及生物碱等药用动物中多种实用成份的溶出率，因此，在对于药用石斛加工时，倡导可先以酒炙方式妨碍炮制，以削减其实用成份的溶出率，延迟煎煮的光阴。同时，运用超微破碎捣毁技术对于石斛属动物妨碍加工，尽管石斛碱的患上率差距不大，可是却大大降职了石斛多糖的溶出率，而且平凡粉以及超微粉呈现出相似的红外光谱罗致，诠释其实用成份在超微破碎捣毁历程中并无被破损，故超微破碎捣毁技术也不失为药用石斛属动物的一种实用加工方式。随着今世加工技术的不断发展，石斛属动物的加工方式也在不断地妨碍着改善以及美满，特意是其去世板方式。倡导未来可对于传统的繁多加工技术以差此外方式妨碍组合优化，以达到斲丧老本与产品质量之间的稳态失调，进一步普及中草药动物药用成果成份提取运用率。

3石斛碱的分解蹊径

自1970年Kaneko等初次以二氢黄蒿萜酮为起始资料分解了石斛碱的三环骨架结构以来，对于石斛碱的家养分解蹊径报道从未陆续。王亚芸等对于石斛碱的家养分解蹊径妨碍了详尽的综述。随着今世迷信技术的发展普及，对于石斛碱的家养分解蹊径妨碍着不断地美满以及改善。Padwa等运用呋喃甲酸酯的IMDAF环加成/重排序列实现为了(±)-Dendrobine的正式分解，将重新部署的环加合物转化为Kende的低级中间体惟独要8个步骤；Hu等运用手性催化剂(20moL%催化剂ent-8)在甲苯中反映48h，从非手性组分的Diels-Alder反映中患上到手性产物，为经由Kende反映妨碍(—)-Dendrobine的对于映抉择性分解开拓了新的道路；Kreis等报道了一种(—)-Dendrobine的不同过错称分解蹊径，总共需要18步，总患上率为4.0%，大大改善了以往的任何分解蹊径的产量；Lee等开辟了一种可能快捷患上到石斛碱中间结构的过渡金属催化级联工艺，并可防御不晃动中间体的天生；Guo等报道了一种惟独要12步(总患上率：6.7%)概况11步(总患上率：3.8%)对于映抉择性全分解左旋石斛碱(—)-Dendrobine的方式。

20世纪70年月以来，对于石斛碱化学分解蹊径的钻研从未陆续，为化学分解药物提供了较好的根基。可是当初石斛碱发挥其药用成果的主要蹊径依然以食用含有石斛碱的药用石斛属动物的别致或者去世板茎为主，故若何普及石斛碱在药用石斛属动物中的含量仍需加以关注。

朱胜男运用茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)、一氧化氮供体(SNP)三种信号份子对于金钗石斛组培苗妨碍解决，并比照测定其石斛碱含量，经由构建cDNA文库以及接管实时荧光定量PCR技术，筛选到2个退出金钗石斛中石斛碱代谢分解蹊径的紧张酶基因：托品酮复原酶基因DnTRI以及DnTRII；李金玲以石斛碱含量存在清晰差距的区别时期金钗石斛茎为样本，妨碍数字基因表白谱(DGE)的测序，同时构建金钗石斛转录组文库，对于区别时期金钗石斛茎中的差距表白基因(DEGs)妨碍合成，对于DEGs的数目、功能以及表白模式妨碍比照合成，系统筛选石斛碱分解代谢蹊径上的相干基因，并经由实时荧光定量PCR技术妨碍验证。最终筛选出5个退出石斛碱分解蹊径的紧张酶基因：甲羟戊酸激酶(MVK)基因(Unigene1219)、赖氨酸甲基化酶基因(CL429)、异戊烯焦磷酸异构酶(IDI)基因(CL3435)、法尼基转移酶基因(CL11407)以及半胱氨酸甲基酯酶基因(CL8067)。开始提出了石斛碱的萜类分解蹊径为：先遵照萜类化合物组成的配合蹊径至单萜［甲羟戊酸(MVA)蹊径以及2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)蹊径］，再遵照倍半萜蹊径妨碍生物分解。

从动物内生菌方面动手，钻研石斛碱分解蹊径也不失为一条很好的钻研策略。闫浩利等钻研发现，经菌根真菌MF23(Mycenasp.)解决后的组培苗石斛碱含量比比力组高15.69%。Li等散漫转录组高通量测序以及实时荧光定量逆转录聚合酶链式反映(qRT-PCR)对于真菌MF23影响石斛碱的浸染机制妨碍了探究，服从呈现，与石斛碱倍半萜骨架组成相干的乙酰辅酶A酰基转移酶(AACT)、焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶(MVD)、磷酸甲羟戊酸激酶(PMK)以及萜烯合酶(TPS21)基因在真菌MF23接种9周后表白水平发生清晰变换，判断MF23可能经由调节退出甲羟戊酸蹊径的基因表白来影响石斛碱的生物分解，为石斛碱分解蹊径的钻研奠基了根基。该团队在近多少年中运用反转录聚合酶链式反映(RT-PCR)以及cDNA最后快捷扩增(RACE)技术，从金钗石斛中别离克隆患上到3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGS)基因：DnHMGS(KX789180)；3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A复原酶(HMGR)基因：DnHMGR2(KX825920)；MVD基因：DnMVD(KY626328)，并进一步钻研发现，克隆到的基因均受到菌根真菌MF23的调控，为进一步剖析菌根真菌MF23对于金钗石斛中石斛碱分解代谢蹊径调控机制奠基了钻研根基。

动物的次生代谢平凡都波及良多条转录因子、紧张基因及其对于应酶的相互协同表白。随着今世生物份子技术的发展，对于动物次级代谢产物分解蹊径上的紧张基因妨碍超表白，进而增长次生代谢产物的天生已经成为钻研的热门。石斛碱根基骨架为含15个碳原子、有一个五元内酯环型倍半萜类生物碱，当初石斛碱分解蹊径尚不清晰，仅见于大批对于石斛碱分解蹊径上紧张酶基因相干的钻研，迄今为止共筛选出11个退出石斛碱分解蹊径的紧张酶基因，对于石斛碱重大的代谢分解蹊径仍需要睁开少许钻研使命。

4展望

在中草药的种类、种植、收获、加工以及贮存等使命挨次中，惟独以中草药实用成份的“质”以及“量”为条件，能耐确保中草药应有的疗效。石斛碱具备神经系统呵护、清热止痛、抗炎症、血汗管呵护、抗癌以及抗甲型流感病毒等药用成果，具备很好的发掘后劲与运用远景，但咱们在关注石斛碱药用成果的同时，也应该对于其毒理性妨碍相干的钻研，从而可能公平、功能地发挥其药用价格。

尽管对于影响石斛中石斛碱含量的因素已经有至关多的钻研报道，可是也存在未必的规模性：(1)所收集的资料是否具备区域代表性有待考究；(2)大少数资料都是家养石斛，愿望的年限无奈患上到一律操作；(3)石斛种类繁多、种质混合，石斛种类判断有待进一步的考究；(4)检测方式的区别也会对于石斛碱的含量造成未必的影响。因此，当初钻研服从只能在未必水平上依据所收集的资料对于区别药用石斛属动物的品质做出预料，为其新育种技术在未必水平上提供事实反对于。当初，我国获取中药药效成份的方式主若是依附于从药用动物中间接提取别离，但药用动物的种植易受产地、天气、种类以及病虫害等的影响，进而导致药用活性成份产量以及品质的不晃动。故应加大对于石斛碱在动物体内生物分解蹊径的钻研力度，清晰紧张酶基因，经由基因表白调控、转基因等伎俩实现其在植株中的功能分解，概况经由火解生物学技术实现石斛碱的异源生物分解，进而普及药用石斛属动物中石斛碱的含量，为中药资源的可不断运用发展提供紧张的迷信意思以及运用价格。

申明：本文所用图片、翰墨源头《中国食物与营养》2020年12月，版权归原作者所有。如波及作品内容、版权等成果，请与本网分割

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