磷脂酸(简称为PA)是脱糖一种二酰基甘油磷脂，也是大豆的别细胞膜的组成成份之一，PA份子内含有甘油骨架，粉末其中sn-1以及srt-2羟基被脂肪酸酯化，磷脂离St／-3位被磷酸基团取代。中磷脂酸钻研发现PA具备增长细胞有丝割裂、脱糖引起肌肉缩短、大豆的别增长激素渗透等生物学功能，粉末在食物、磷脂离药品以及化装品等多个畛域具备紧张的中磷脂酸应有价格。大豆磷脂富含PA成份，脱糖含量约为5％～15％，大豆的别是粉末制备PA的主要商业源头。当初PA的磷脂离制备方式主要有三种，即溶剂法、中磷脂酸酶法与化学分解法。陶银华等运用乙醇与甲醇挨次萃取大豆粉末磷脂，之后运用体积比为1:4的正己烷-甲醇妨碍液液萃取，经锌离子解决患上到含量为98％的PA产物，接管率较低，为10％。TsutomuNishide等经由磷脂酶D水解磷脂酰胆碱制备PA，可患上含量80％以上PA产物，但磷脂酶D较为高尚。陈福明等运用化学分解的方式，以双硬脂酸甘油脂为质料，与五氧化二磷反映后患上到粗磷脂酸，溶于低碳醇、酮、煤油醚等溶剂后重结晶纯化，去世板后可患上含磷量在3.5％以上的磷脂酸产物，该法反映条件要求较高，工艺重大。

本文用酸性乙醇提取脱糖磷脂中的PA，提取液经冷冻积淀后，经由调节pH患上到PA产物。该方式具备工艺重大的特色，易于规模化制备PA。

一、资料与方式

一、质料与试剂

大豆粉末磷脂(SPO)，江苏省曼氏生物科技有限公司；脱糖大豆粉末磷脂，试验室自制；正己烷、无水乙醇、氨水、盐酸，合成纯，国药总体化学试剂有限公司；正己烷、异丙醇，色谱纯，国药总体化学试剂有限公司；PA规范品，美国sigma公司。

二、仪器与配置装备部署

EL204-IC电子合终日平：MettlerToledo仪器有限公司；RE-52A型真空旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂；SHZ-D(III)水循环式真空泵：巩义市予华仪器有限公司；Waters1525功能液相色谱仪(蒸发光检测器)：美国沃特世公司；HH-4恒温水浴锅：常州市金坛区环宇迷信仪器厂；DKZ系列电热控温振荡水浴锅：常州金坛精达配置装备部署有限公司；KH5200DE型超声洗涤器：上海冠特超声仪器有限公司；ZK-072型真空烘箱：上海市试验仪器总厂。

三、试验方式

（1）PA提取试验

精确称取脱糖磷脂10.00g于500mL锥形瓶中，按未必料液比退出未必酸醇比的酸性乙醇(V25％HCI:V无水乙醇来呈现酸醇比)，升温到未必温度搅拌确守光阴后，过滤。将酸提液在-20℃下冷冻4h光阴，滤去积淀后，运用氨水调清液pH至积淀析出，取积淀溶于未必量正己烷中，短缺搅拌后滤去不溶物，滤液经旋转蒸发脱溶后患上PA产物。

（2）HPLC合成

样品配置装备部署：用行动相消融患上到浓度为3mg／mL的样品溶液，经0.221μm膜过滤，接管外标法妨碍HPLC检测。

HPLC条件：色谱柱：Si-60(250妹妹×4.6妹妹，5μm)；柱温：30℃。检测器：蒸发光检测器，漂移管温度：55℃。进样量：10μL。行动相为正己烷：异丙醇：1％乙酸(8:8:1，v／V／V)，流速：1.0mL／min。

PA规范溶液的配置装备部署：精确称取10.0mg品质的PA于5mL容量瓶中，运用行动相消融并定容。取上述溶液分说稀释为0.二、0.四、0.八、1.0、1.五、2.0mg／mL的规范溶液。

（3）接管率的合计

PA接管率的合计见下式：

二、服从与合成

一、PA含量的测定

规范样品、质料以及产物的HPLC图见图一、图2以及图3，由图1可见PA的保存光阴为7.6min，图二、图3中保存光阴为7.6min的峰为PA。

以PA含量为横坐标，积分面积为纵坐标绘制规范曲线，浓度畛域为0.2～2.0mg／mL，回归方程为Y=6704241.57x-181158.33，R2=0.998，服从表明，PA在浓度畛域为0.2～2.0mg／mL之间呈优异的线性关连，规范曲线见图4。

合成质料中的PA含量为9.3％。
 

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