黄曲霉毒素(aflatoxin，汉中AF)是市市售动审核由黄曲霉(Aspergilusflavu)以及寄生曲霉(Aspergillusparasiticus)经聚酮蹊径所产生一组有毒次生代谢产物，其结构含有一个二呋喃环与一个氧杂萘邻酮。物油当初已经知的中黄状态黄曲霉毒素有20多种，已经别离判断出的曲霉有黄曲霉毒素有 B 一、B 二、毒素G 一、传染G 2 等18种，汉中其中AFB1毒性以及致癌性最强。市市售动审核人造情景下，物油农作物如水稻、中黄状态油菜籽、曲霉花生等，毒素在种植落伍展、传染收获的汉中历程中，很重大被产毒真菌传染，被传染的谷物，在蕴藏、加工、运输等历程经由食物链各个关键传递最终危害人类瘦弱。散漫国食粮与农业机关（FAO）统计，每一年全天下食粮快要有四分之一受到真菌毒素传染，造成为了数以亿计的经济损失。AF的产毒需要适量的温湿度以及经济发展状态无关，热带以及亚热带区域降水多、温度高的区域食物受黄曲霉毒素的传染状态较严正，欧美经济发达区域的传染状态远低于西北亚等履历落伍区域。

经由少许文献查阅，胡佳薇等人评估过2012-2015陕西市售食物中AF的传染状态，对于陕南区域总体的市售食物妨碍了审核，未见对于汉中区域动物油中黄曲霉毒素的系统传染审核合成，也为见对于该区域动物油中毒素超标的相干陈说以及处罚。汉中地处陕西南部，整年天气潮湿，降水丰沛，陕西最大的低劣油菜籽种植基地，有“陕西鱼米之乡”的美称，菜籽油是当地居夷易近伙食结构中的主要种类。随着社会经济的发展，商品流通减速，汉中市场上除了当地产菜籽油外，尚有来自其余区域的大豆油、花生油、调以及油、香油等。本钻研散漫汉中当地的种植条件以及饮食习性，从8个行政区县中网络了160份动物油，妨碍4种AF的散漫传染状态的审核，评估该区域动物油中AF传染状态，系统把握该区域AF的传染状态，为食物牢靠操作以及当地居夷易近的AF伙食披露评估提供依据。

1 资料以及方式

1.1资料

1.1.1样品

2019年1月至2020年12月，陆续对于汉中市的8个行政区县的超市商场、粮油店、斲丧企业、餐饮店遵照行政区域为分成特色妨碍随机网络（见图一、图2）。累计共网络到食用动物油160份（其中菜籽油120份，花生油、大豆油、调以及香油等40份）。逐批采样后封存，去世板阴凉处保存，备检。

1.1.2 仪器配置装备部署

水浴恒温振荡器（常州亿能试验仪器厂），合终日平（日本岛津 d=0.01 g）；氮吹仪（睿科科技有限公司）；功能液相色谱仪（日本岛津LC-20AD，荧光检测器）；光化学衍生器、C18色谱柱（月旭科技有限公司）；黄曲霉毒素免疫亲以及柱3mL（Rome labs）；MIlli-Q纯水机（美国密理博公司）。

1.1.3 试剂

甲醇（色谱纯，赛默飞）；吐温-20（合成纯，科密欧）氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钾（合成纯，科龙），黄曲霉毒素规范溶：AFG2 0.537 μg/mL，AFG1 0.539 μg/mL , AFB2 2.08 μg/mL，AFB1 2.07 μg/ mL（青岛普瑞邦 STD#1081）。

1.2 方式

1.2.1样品预解决

遵照国标GB5009.22-2016《食物牢靠国家规范食物中黄曲霉毒素B族以及G族的测定》第三法功能液相色谱-柱后衍生法妨碍试验。

样品提取：称取5.0 g（精确至0.01g）破碎捣毁搅浑平均样品于离心管中，退出甲醇水溶液（80+20）20 mL涡旋搅浑，摇床中震撼1 h，玻璃滤纸过滤，滤液备用。

样品传染：将免疫亲以及柱掏出复原至室温，精确排汇2 mL滤液，退出25 mL的PBS溶液于25 mL注射器中，以2 mL/min速率匀速下滴，样液滴完后，用10 mL的水淋洗亲以及柱2次，最后用2 mL甲醇洗脱亲以及柱，收集洗脱液，氮气吹干用行动相定容至1mL，涡旋，过滤膜，装瓶上机检测。该法的检出限为AFG2 0.01 μg/mL，AFG1 0.03 μg/mL，AFB2 0.01 μg/mL，AFB1 0.03 μg/ mL。

1.2.2液相条件

行动相：甲醇-乙腈-水（47：3：50，V/V）；进样量：20 μL；检测波长：激发波长：360 nm，发射波长440 nm；流速：0.8 mL /min；柱温：35℃；色谱柱：月旭C18柱（4.6 妹妹×250 妹妹，5 μm）。

1.2.3评估依据

全天下有 100 多个国家以及区域拟订了食物以及饲料中 AFT限量规范。我国在GB2761-2017仅对于食物中AFB1接管了严酷的限量规范，动物油（不包罗玉米油、花生油）均要求≤10 μg/kg，玉米油、花生油要求≤20 μg/kg，临时不对于AF总量的限量要求。

1.2.4规范曲线

用AF混标配制规范曲线，详尽梯度为（ng/mL）：AFB₁:1.0四、2.0八、3.十二、4.1六、5.20、10.4；AFB₂:1.0三、2.0七、3.十、4.1四、5.1八、10.3；AFG₁:0.2七、0.5四、0,8一、1.0八、1.3五、2.70；AFG₂:0.2七、0.5三、0,80、1.0六、1.3三、2.66，经由光化学衍生器柱后衍生，带荧光检测器的功能液相色谱别离测定，患上出各组分区别浓度下的峰面积，以峰面积对于标品的浓度妨碍线性回归合成，服从见表1。

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