(二)示波极谱法

一、食物色剂道理

样品经积淀卵白质、削减作废脂肪后，测定在弱酸性的测定条件下亚硝酸盐与对于氨基苯磺酸重氮化后，在弱碱性条件下再与8-羟基喹啉偶合组成橙色染料，食物色剂该偶氮染料在汞电极上复原产生电流，削减电流与亚硝酸盐的测定浓度呈线性关连，可与规范曲线比照定量。测定

二、食物色剂试剂

①亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾[K₄Fe(CN)₆·3H₂0]，削减用水消融，测定并稀释至1000mL。测定

②乙酸锌溶液：称取220.0g乙酸锌[Zn(CHC00)₂·2H₂0]，食物色剂加30mL冰乙酸溶于水，削减并稀释至1000mL。测定

⑧饱以及硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠)[NaB₄0₇·10H₂0]，溶于lOOmL热水中，冷却后备用。

④对于氨基苯磺酸溶液(8g/L)：称取2g对于氨基苯磺酸，用热水溶液，再加25mL盐酸(1.Omol/L)，移至250mL容量瓶稀释至刻度。

⑤8-羟基喹啉溶液(1g/L)：称取0.250g8-羟基喹啉，加4mL盐酸(0.1 mol/L)以及大批水消融，移至250mL容量瓶稀释至刻度。

⑥EDTA溶液(0.10mol/L)：称取3.722gEDTA(C₁₀H₁₄N₂0₈Na·2H₂0)加水30mL消融，转入100mL容量瓶中用水稀释至刻度。

⑦氨水(5％)：排汇28％的浓氨水5.OOmL于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

⑧亚硝酸钠规范溶液：精确称取0.1000g亚硝酸钠于硅胶十燥器中24h，加水消融移入500mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每一毫升至关于200μg亚硝酸钠。

⑨亚硝酸钠规范运用液：精确排汇亚硝酸钠规范溶液5.OOmL于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每一毫升至关于5μg亚硝酸钠。再取10.OOmL该稀释液于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每一毫升至关于0.5μg的亚硝酸钠。

三、仪器

①小型绞肉机。

②示波极谱仪。

四、合成步骤

①样品解决

称取5.000g经绞碎混匀的样品，置于50mL烧杯中，加12.5mL硼砂饱以及溶液，搅拌平均，以70⁰C的水300mL将样品洗入500mL容量瓶中，于滚水溶中加热15min，掏出后冷却至室温，而后一壁转折，一壁退出5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再退出5mL乙酸锌溶液，以积淀卵白质。加水至刻度，摇匀，部署30min，作废下层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液50mL，滤液备用。

②测定

排汇3mL上述滤液于lOmL容量瓶(或者比色管)中，另取0，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50，3.00mL亚硝酸钠规范溶液(至关于0，0.25，0.50，0.75，1.00，1.25，1.50μg亚硝酸钠)于lOmL容量瓶(或者比色管)中。于规范与样品管中分说退出0．20mLEDTA溶液(0．10mol/L)，1.50mL对于氨基苯磺酸溶液(8g／L)，混匀，行动3～4min后各退出1.00mL 8-羟基喹啉溶液(1g／L)以及0.5mL氨水(5％)，用水稀释至刻度，混匀，行动10～15min，将试液全副转入电解池中(10mL小烧杯)。在示波极谱仪上接管三电极系统妨碍测定(滴汞电极为丁作电极，饱以及甘汞电极为参比电极，铂电极为铺助电极)。

③测定参考条件

原点电位调节在-0.2V；倍率为0.1(可能依据试样中亚硝酸盐含量多少多抉择适量的倍率，含量高，倍率高，倍率抉择在0.1以上；反之，倍率抉择在0.1如下)；电极收尾拔至三电极、导数档；丈量开关拔至阴极。

将三电极插入电解池中，每一隔7s仪器自行扫描一次，在荧光屏上记实-0.56V左右(应承电位晃动10～20mV)的极谱波高，绘制规范曲线比照。

三、硝酸盐的测定

测定硝酸盐罕用的方式是镉柱法。尚有气相色谱法、荧光法以及离子抉择性电极法等。

下面介绍镉柱法：

一、道理

样品经积淀卵白质、作废脂肪后，将样品提取液经由镉柱，使其中的硝酸根离子复原成亚硝酸根离子。在酸性条件下，亚硝酸根与对于氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合组成红色染料，经比色测患上亚硝酸盐总量，从复原先后亚硝酸盐量即可求患上硝酸盐的含量。

二、仪器以及试剂

(1)仪器

①镉柱

a．海绵状镉粉的制备：投入充实的锌皮或者锌棒于500mL 200g/L的硫酸镉溶液中，经3～4h，当溶液中的镉全副被锌置换后，用玻璃棒僻静刮下，掏出残余锌皮，使镉沉底，倾去下层清液，以蒸馏水用歪斜法洗涤，而后移入机关捣碎机中，加500mL水。捣碎约1min，用水将金属细粒洗至规范筛上，取20～40目之间的全副。置试剂瓶中，用水封盖保存，备用。

b．镉柱装填：如图3—2所示。用蒸馏水装满镉柱玻璃管，并装入2cm高的玻璃棉作垫。将玻璃棉压向柱底，并将其中所包罗的空气全副倾轧，在僻静敲击下加人海绵状镉至8～10cm高，下面用1cm高的玻璃棉拆穿困绕，上置一个储液漏斗，最后穿过橡皮塞与镉柱玻璃管细密衔接。

如无尚述镉柱玻璃管，也可用25 mL酸式滴定管代用。

参考资料：食物中有毒有害物资检测

相干链接：亚硝酸盐，8-羟基喹啉，硼砂