我国具备悠长的绿茶饮茶历史。传统意思上的降糖浸染机制茶叶因为含有茶多酚，其抗氧化、绿茶翦灭从容基的降糖浸染机制功能已经为人们所熟知。茶多酚是绿茶逐个类多酚类化合物，它作为茶叶中的降糖浸染机制主要实用成份，占茶叶干重的绿茶30％左右，其源头宽泛。降糖浸染机制近些年来钻研表明，绿茶茶多酚具备多种药理效应，降糖浸染机制如降脂、绿茶防御血栓组成以及抗朽迈、降糖浸染机制抗心肌缺血等浸染。绿茶绿茶富含茶多酚以及茶多糖，降糖浸染机制具备很好的绿茶保健浸染，因此近些年来作为一种滞销茶饮料走入人们的生涯。本试验以绿茶为资料，审核了绿茶提取物对于Ⅱ型糖尿病大鼠糖耐量的影响，品评辩说其对于α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶的抑制作用及对于兔刷状缘囊泡葡萄糖转运能耐的抑制作用，以期为揭示绿茶的降糖浸染机理提供依据。

1 资料与方式

1.1 资料、试剂与仪器

绿茶，湖北省宣恩县五家台茶厂斲丧的级外炒青绿茶。酵母α-葡萄糖苷酶(源头Saccharomycessp.)日本以及光公司；猪α-胰淀粉酶(type1-A)Sigma公司；大鼠胰岛素酶免试剂盒法国SPI-BIO公司。

IWAKIREN-1型旋转蒸发仪；EYELAFDU-830型冷冻下燥仪；德国Bayer微量血糖测定仪：HITACHIU-2010型紫外分光光度仪；Wallac1209Rackbeta闪灼记数器。

1.2 绿茶提取物的制备

100g绿茶用2L蒸馏水浸泡住宿。过滤后滤渣重复提取三次。将提取液并吞后，减压蒸馏、冷冻去世板患上绿茶干粉。其茶多酚含量为37.9％(酒石酸亚铁比色、法)，茶多糖为6.1％(蒽酮硫酸法)。

1.3 动物分组及糖耐量以及胰岛素测定

取16只GK/Jcl雄性大鼠(Ⅱ型糖尿病模子日本株式会社)，体重为259～28lg，随机分为两组。试验组大鼠以0.5g/kg剂量灌胃绿茶提取物同时灌胃蔗糖或者淀粉，比力组则以蒸馏水替换绿茶提取物。糖耐量测定方式是，断食16h后，灌胃蔗糖2g/kg或者可溶性淀粉2g/kg，在0、0.五、1以及2h用微量血糖测定仪测定血糖。胰岛素测定按试剂盒诠释老例妨碍。

1.4 α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定

α-葡萄糖苷酶的抑制活性的测定接管渡边等的方式。将α-葡萄糖苷酶溶于含有1g/L牛血无辜卵白的pH7.0100妹妹ol/L磷酸缓冲液中作为酶液，4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷溶于相同缓冲液中作为底物液。取10μl样品、240μl(0.053U)酶液以及750μl底物液，在37℃反映15min。用0.5mlTris溶液停止反映，测A_400nm以及IC₅₀值(IC₅₀界说为抑制酶活性50％时所需的抑制剂浓度)。

1.5 α-淀粉酶抑制作用的测定

将10μl淀粉酶溶于4ml含有50妹妹ol/LNaCl、5妹妹ol/LCaCh、0.5g/LTritonX-100的pH6.925妹妹ol/LPiperazine-N，N’-bis2-ethanesulfonicacid(PIPES)缓冲液中作为酶保存液，测定时用缓冲液稀释40倍运用。反映系统由650μlPIPES缓冲液、50u1样品液、100μl酶液以及200μl25g/L可溶性淀粉溶液组成，在37℃反映10min，用0.5ml100ml/L乙酸溶液停止反映，碘法测定A_700nm以及IC₅₀值。

1.6 刷状缘囊泡葡萄糖转运能耐的测定

将兔小肠浸泡于300ml含200妹妹ol/L甘露醇的pH7.42妹妹ol/LHEPES[N-(2-hydroxyethyl)piperazine-N’-(2-ethanesulfonicacid)]Tris缓冲液中，刮取小肠黏膜，在冰浴中高速匀浆2min。匀浆液中加0.619固体MgCl2，冰浴搅拌20min后，在4℃3000×g离心15min，所患上上清在4℃3500×g再离心30min。此积淀用10ml含100妹妹ol/L甘露醇、0.1妹妹ol/LMgS04的pH7.42妹妹ol/LHEPES-Tris缓冲液消融，在4℃35000×g离心40min，所患上积淀用3倍体积含300妹妹ol/L甘露醇、0.1妹妹ol/LMgS04的pH7.4 10妹妹ol/LHEPES.Tris缓冲液重新消融，用25号注射针头重复抽吸，即患上刷状缘囊泡悬液。以³H-D-葡萄糖为底物，用快捷过滤法测定刷状缘囊泡葡萄糖转运能耐。抑制葡萄糖转运活性50％时所需的抑制剂浓度界说为IC₅₀。

1.7 统计学解决

数据均以X±S呈现，并接管统计软件妨碍t魔难。

2 服从与合成

2.1 绿茶提取物对于糖尿病大鼠糖耐量及血胰岛素水平的影响

蔗糖或者可溶性淀粉负荷后2h，糖尿病大鼠血糖水平较比力组清晰着落，但血胰岛素水平根基不变换(表一、2)。

2.2 绿茶提取物对于α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶的抑制作用

绿茶提取物具备较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性，其IC50值为0.13g/L。绿茶提取物对于α-淀粉酶也呈现出抑制活性，浓度为1g/L时，其抑制率为21％，抑制活性较弱。

2.3 绿茶提取物对于兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响

响绿茶提取物剂量依附性着落兔小肠刷状缘囊泡的葡萄糖转运活性，其IC50值为3.5g/L。随着浓度着落，兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性着落幅度清晰减小，呈直角双曲线关连。其对于刷状缘囊泡葡萄糖转运的抑制作用为快捷反映。

3 品评辩说

在糖尿病降糖药物家族里α-葡萄糖苷酶抑制剂是一组经由延缓糖的消化以及罗致来达到着落餐后血糖指标的口服降糖药，其浸染特色是在糖消化的最后一步抑制双糖降解为单糖。α-淀粉酶抑制剂也能减慢食物淀粉在肠道中的消化，抑制餐后血糖水平的着落。因此两者是近些年来糖尿病口服药物开辟钻研的热门。肠道对于葡萄糖的罗致则以葡萄糖转运体的被动罗致来实现，因此抑制葡萄糖转运活性是着落餐后血糖的紧张关键之一。本钻研表明，绿茶提取物是α-葡萄糖苷酶的抑制剂，对于α-淀粉酶也有未必抑制作用，同时着落兔小肠刷状缘囊泡的葡萄糖转运活性，但没能改动对于本模子血胰岛素水平。绿茶提取物具备降糖浸染，主要呈现为能着落糖尿病大鼠蔗糖或者淀粉负荷后血糖的不断着落趋势，从而改善其糖耐量。钻研觉患上这一浸染可能与绿茶提取物对于α-葡萄糖苷酶以及α-淀粉酶的抑制作用及葡萄糖转运活性的抑制作用无关。

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