动物饮料是液质一类（除了果蔬汁、咖啡以及茶外）以非果蔬类动物可食用的联用料中根、茎、法同防腐叶、时测花、定动的种果及动物自成份泌的物饮味剂汁液等为质料经加工或者发酵制成的液体饮料。因为动物饮料的剂及质料以及提取物区别，成果方面或者多或者少都市对于人体起到一些保健浸染，种甜占有着未必的液质市场份额。商家为节约老本以及改善动物饮料的联用料中口感，在动物饮料中退出安赛蜜、法同防腐苦涩素、时测糖精钠、定动的种阿斯巴甜中分解甜味剂以及苯甲酸、物饮味剂山梨酸、剂及脱氢乙酸等防腐剂。因此，建树快捷、精确测定动物（类）饮料中多种分解食物削减剂的方式显患上尤为紧张。我国国家规范 GB2760-2014《食物牢靠国家规范 食物削减剂运用规范》对于动物（类）饮料中分解甜味剂以及防腐剂的最大运用量作出了清晰规定，如安赛蜜为 0.3g/kg、苦涩素为 0.65g/kg、苯甲酸为 1.0g/kg 以及山梨酸为 0.5g/kg 等。当初已经报道的食物中防腐剂以及甜味剂的检测方式主要有分光光度法、离子色谱法、气相色谱法、功能液相色谱法、功能液相色谱 - 串联质谱法、离子色谱 - 串联质谱法等。其中，分光光度法因配置装备部署灵便度受限，不适用于痕量合成；离子色谱法对于样品的要求比照高，适用于基质较为腌臜的液体样品；气相色谱法常需将化合物衍生化或者妨碍其余反映后检测，如苦涩素，多组分同时合成有未必难度；功能液相色谱法同时测定多组分时抉择性较差，且存在样品假阴性征兆。色谱 - 质谱联用法因为其灵便度高、抉择性好，对于低浓度的指标组分也能精判断量测定，适用于多组分同时妨碍合成。本试验接管超功能液相色谱 - 串联质谱仪，建树了对于动物（类）饮料中 3 种防腐剂以及 4 种分解甜味剂同时测定的合成方式。

1 资料与方式

1.1 资料、仪器与试剂

样品：凉茶、冬瓜茶、菊花茶均购自当地批发超市以及商铺。

仪器：Triple Quad 6500+ 串联质谱仪（美国AB Sciex 公司）；LC-30AD 超功能液相色谱仪（日本 Shimadzu 公司）；AL-204 万分一电子天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）；UX620H 千分一电子天平（日本 Shimadzu 公司）；Milli-Q 超纯水系统（美国 Millipore 公司）；BL22-600B 超声波洗涤机（上海比郎仪器有限公司）；Multi Reax万能型漩涡振荡器（德国 Heidolph 公司）。试剂：甲醇、乙腈（色谱纯，美国 Merck 公司）；甲酸（色谱纯，德国 CNW 公司）；乙酸铵（色谱纯，美国 ROE 公司）；山梨酸、苯甲酸以及糖精钠规范溶液（1.00×103 mg/L，中国计量迷信钻研院）；安赛蜜规范溶液（1.00×103 mg/L，农业部情景呵护科研监测所）；苦涩素（99.1%，德 国 Dr. Ehrenstorfer GmbH 公 司 ）； 脱 氢 乙 酸（99.5%，美国 Chem Service 公司）；阿斯巴甜（99.0%，美国 Supelco 公司）。

1.2 试验方式

1.2.1 色谱条件
色谱柱：Waters Acquity UPLC BEH C18 柱 （2.1妹妹×100妹妹，1.7μm）； 进 样 体 积：5μL；流速：0.25mL/min； 柱 温：35 ℃； 流 动 相：A-10妹妹ol/L 乙酸铵，B- 乙腈，梯度洗脱条件如下表 1。

1.2.2 质谱条件

离子源：电喷雾离子源，负离子模式（ESI-）；气体温度（TEM）：450℃ ；电喷雾电压（IS）：-4500V；气帘气压力（CUR）：35psi；碰撞气压力（CAD）：9psi；雾化气压力（GS1）：40psi；辅助气压力（GS2）：35psi；扫描模式：多反映监测（MRM）；7 种指标化合物的 MRM 参数见表 2。

1.2.3 规范曲线的配制

规范蕴藏液：分说精确称取苦涩素、阿斯巴甜以及脱氢乙酸规范品 0.01g 于 3 个 10mL 容量瓶中，除了脱氢乙酸用过多 25% 乙腈 - 水溶液（V/V）超声辅助消融并定容至刻度外，其余规范品用过多超纯水消融后并定容至刻度，配制成1.00×103mg/L 蕴藏液，于 4℃冰箱中保存。搅浑规范溶液：分说取未必体积的上述规范蕴藏液以及山梨酸、苯甲酸、糖精钠以及安赛蜜规范原液于对于立个 10mL 容量瓶中用超纯水定容，混匀后制患上含安赛蜜 2.50mg/L、苯甲酸 25.0mg/L、山梨酸 100mg/L、脱氢乙酸 100mg/L、糖精钠10.0mg/L、苦涩素 5.00mg/L 以及阿斯巴甜 10.0mg/L搅浑规范溶液，于 4℃冰箱中保存。搅浑规范使命液：分说移取过多体积的搅浑规范溶液，用超纯水配制成系列搅浑规范使命液，现配现用。

1.2.4 样品解决

精确称量搅浑平均的动物饮料样品 1g（精确至 0.001g）于 10mL 比色管中，用超纯水稀释定容至刻度，超声辅助混匀，过 0.22μm 水相微孔滤膜后间接上机进样合成。

1.2.5 定量限以及检出限试验

将上述配制好的搅浑规范使命液按优化好的仪器条件上机妨碍测定，以指标组分色谱峰面积对于响应的规范溶液品质浓度妨碍线性回归合成，患上到各自的线性回归方程以及关连系数。分说对于各指标化合物线性畛域的最低浓度点妨碍信噪比合成，以 S/N=3 时对于应的样品质量浓度为方式检出限，以 S/N=10 时对于应的样品质量浓度为方式定量限，服从见表 3。

1.2.6 接管率以及详尽度试验

市面上动物（类）饮料种类繁多，比照有代表性的是凉茶、菊花茶以及冬瓜茶，故选取这 3 种动物饮料妨碍加标接管试验。在称好的样品中精确退出未必量的 7 种食物削减剂搅浑规范溶液，配成低、中、高 3 个区别削减水平，按上述试验方式解决，平行测定 6 次，扣除了样品本底值后合计服从见表 4。

2 服从与合成

2.1 仪器条件的优化

2.1.1 质谱条件的优化

试验接管注射泵间接进样的方式将预先配制好的 0.200mg/L 各个规范溶液逐个注入串联质谱仪中，在 ESI 正离子以及 ESI 负离子模式下分说妨碍 Q1MS（Q1）全扫描，判断好电离方式后抉择响应较高的准份子离子作为母离子。服从呈现，大全副指标化合物在 ESI 负离子监测模式下的准份子离子质谱品貌响应值高于正离子模式。在Product Ion（MS2）扫描中拔失约号晃动且品貌最强以及次强的碎片离子分说作为定量 / 定性离子，而后在 MRM 监测方式下建树离子对于通道优化各指标化合物的最佳锥孔电压以及碰撞能量。苯甲酸以及脱氢乙酸的定性离子响应较低。优化后所患上的7 种削减剂质谱参数见表 2，运用仪器的被动优化功能患上到其余离子源参数见 1.2.2 质谱条件。

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