三、农药测定方式

(1)方式一：50％乙睛-水[功能液相色谱级(HPLC级)]作为行动相，抉择操作行动相的性多流速为1.48～1.52mL/min。

操作0.05mol/L氢氧化钠溶液以及OPA-MERC反映溶液(试剂制备见下)的残留流速分说为0.48～0.52mL/min。柱温为35℃，农药水解室的抉择温度为100℃。荧光检测器的性多激发波长为340nm，发射波长为455nm。残留狭缝宽度分说为15m以及12nm。农药检测器的抉择光电倍增管设为低值，光阴常数为1s。性多调节检测器灵便度，残留使1.0ng克百威溶液的农药响应为记实仪或者积分仪量程的45％～55％。基线噪声应该＜2％，抉择氨基甲酸酯类杀虫剂应遵照图7-2的性多步骤洗脱。

假如系统停用多少天，则用甲醇替换水挪移相洗涤系统。从储液器中倒出氢氧化钠以及OPA-MERC反映溶液，并用水洗涤储液器以及相连的管子后，再用甲醇洗涤。当再次运用系统时，将行动相改为水(HPLC级)，在储液器中加反映溶液前用水洗涤储液器以及相连管子。

过滤由传染后所患上到的圆底烧瓶中的甲醇提取液，将收集到的滤液(约4.5mL)置于10mL离心管或者其余适量的容器中。因为样品浓度已经知，因此收集的滤液体积多少多不是十分紧张。假如溶液要求稀释，则排汇未必量溶液至另一容量瓶定容至未必体积备用。取10μL甲醇溶液进样。经由农药样品在色谱图上的保存光阴来定性。经由将待测农药色谱峰的峰高或者峰面积与已经知量的规范样品的峰高或者峰面积比照拟来测患上未知农药残留的含量。为了保障农药残留量测定的坚贞性，进待测样品后赶快进标样，待测样品色谱峰以及标样色谱峰应立室在±25之内。

(2)方式二：此法用于不需要柱后水解以及衍生化的荧光农药残留检测。功能液相色谱系统的建树与操作同上述方式一，区别在于：水解室在室温下操作；荧光检测器的激发波长为288nm，发射波长为330nm。将氢氧化钠溶液以及OPA-MERC反映溶液退出行动相时，敞开泵或者氮气流。

测定操作方式同方式一。

(3)试剂制备

①乙腈：全玻璃蒸馏装置重蒸。在运用前，妨碍脱气解决(将乙腈置于玻璃瓶中，抽真空并用磁力搅拌子飞快搅拌5min)，经由解决的乙腈优于功能液相色谱级，可能防御产生杂峰。

②MERC：2-巯基乙醇(MERC)。

③甲醇：全玻璃蒸馏装置重蒸。

④邻苯二醛(OPA)：色谱级。

⑤0.05mol/L硼酸钠缓冲溶液：称取19.1g合成纯：Na₂B₄0₇·10H₂0，用约500mL脱气的功能液相色谱级水在水浴中加热消融，室温下冷却，再用脱气的功能液相色谱级水定容至1L，僻静地将溶液摇匀，尽量即便防御空气进入溶液中。

④0.05mol/L氢氧化钠溶液：即取一份氢氧化钠(碳酸钠的含量＜5％)。用一份水消融。塞紧盖后静置约莫10d，直到碳酸钠沉入下层。排汇27mL上部廓清的氢氧化钠溶液，转入10mL容量瓶，并用水定容，患上到5mol/L氢氧化钠溶液。排汇10mL5mol/L氢氧化钠溶液，退出1L容量瓶中，用脱气的功能液相色谱级水定容，僻静地将溶液摇匀，尽量即便防御空气进入溶液中。

⑦水(功能液相色谱级)：商品纯水或者用纯化水装置制备的蒸馏水或者去离子水，用于功能液相色谱时，按乙腈脱气的相同方式妨碍脱气。水必须尽量即便纯化以防御窒息功能液相色谱柱或者泛起颇为峰形。用于功能液相色谱的水必须是功能液相色谱级的(不特意指明为功能液相色谱级的水是指蒸馏水)。

⑧OPA-MERC反映溶液：称取500mg邻苯二醛(OPA)退出1L容量瓶中，用10mL甲醇消融，退出500mL0.05mol/L硼酸钠缓冲液以及1mL2-巯基乙醇(MERC)。用硼酸钠缓冲液定容，僻静地将溶液摇匀，尽量即便防御空气进入溶液中。(从市场购患上的塑料瓶中的硼酸盐溶液概况低纯度的邻苯二醛会造成荧光布景过高)。制备的溶液可能在室温下保存2d，在冰箱或者在氦气呵护下可能贮存1周左右。

二、苯脲类除了草剂多残留合成

(一)方式道理与适用性

苯脲类除了草剂用甲醇提取，提取液接管液液调配以及弗罗里硅土柱色谱传染。残留物接管反相柱，柱后光解、衍生化，衍生物经功能液相色谱(HPLC)荧光检测器检测。

本方式可用于14种非脂肪性样品中至少14种苯脲类除了草剂在0.05mg/kg、0.5mg/kg以及1.0mg/kg水平的残留合成。

(二)规范溶液配制

每一种规范品勤勉用液相色谱级异丙醇配制蕴藏溶液(1mg/mL)。取过多的每一种蕴藏规范溶液搅浑，用乙腈-水(功能液相色谱级)(1∶1)稀释成使命标样。用1.25μg/mL的标样妨碍功能液相色谱检测。蕴藏溶液保存在冰箱中，每一周重新配制使命标样。

(三)提取

称取50g样品，退出离心瓶中，加100mL甲醇，用Polytron匀浆仪，速率8档，匀浆1.5min。匀浆液以1500r/min离心5min，倾出80～100mL上清液，用玻璃棉过滤，250mL量筒接管。向离心瓶中加100mL甲醇，8档匀浆1min。离心，上清液用玻璃棉过滤，全副转入下面的250mL量筒。记实全副甲醇提取液体积。

(四)液液调配

将甲醇提取液全副转入500mL分液漏斗。加30mL饱以及氯化钠溶液以及50mL正己烷，振摇30s，静置分层。下层水相转入1L分液漏斗中，分液漏斗中先加500mL水以及30mL饱以及氯化钠溶液。弃去己烷相。向1L分液漏斗中加200mL二氯甲烷，振摇1min。二氯甲烷相经25妹妹×50妹妹无水硫酸钠柱脱水，转入装好的具5mL刻度接管瓶的500mLK-D稀释器中。水相用100mL二氯甲烷提取2次，脱水后一并转入K-D稀释器。用50mL二氯甲烷淋洗硫酸钠柱，淋洗液一并转入K-D稀释器。在K-D稀释器中退出沸石，稀释至约3mL，转入弗罗里硅土柱传染。

(五)弗罗里硅土柱传染

称取4g活化的弗罗里硅土，装入10妹妹内径色谱柱，下面加1cm硫酸钠，用30mL二氯甲烷预淋，弃去淋洗液。

当二氯甲烷层挨近硫酸钠层顶部时，将具5mL刻度接管瓶的250mLK-D稀释器置于色谱柱下。将稀释的提取液转入色谱柱，容器用约3mL二氯甲烷润洗，润洗液转入色谱柱。

当提取液挨近硫酸钠层顶部时，用3mL二氯甲烷淋洗色谱柱2次，使每一次的淋洗液均挨近硫酸钠层顶部。最后一次润洗液挨近硫酸钠层顶部时，用50mL20％丙酮-二氯甲烷淋洗色谱柱。淋洗液在蒸汽浴上稀释至约3mL，移去接管瓶，40℃水浴用氮气稀释至干。移取2mL乙腈-水(功能液相色谱级)(1∶1)，退出接管瓶中。

(六)测定

测定接管功能液相色谱仪(HPLC)妨碍，柱后光解、衍生，荧光检测。

一、道理乙腈一水中的残留物以甲醇一水为行动相，经C₁₈反相柱梯度洗脱、别离，柱中洗脱的残留物(流出物经由Teflon套管以削减在紫外光下的披露)在线光解为胺，胺在线与邻苯二醛及2-巯基乙醇反映天生荧光基团，经由荧光检测器检测。本法对于苯脲类除了草剂有极强抉择性。

二、仪器

(1)溶剂过滤装置：具Luer—Lip头的10mL注射器，装备直径13妹妹的sueling不锈钢过滤头、直径13妹妹的5μmLS型滤器或者直径13妹妹用聚丙烯牢靠的0.2μm尼龙滤膜。也可用元需注射器的预装好的装置。

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